elisa实验技术服务

elisa实验技术服务内容：您只需将需要检测的动物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……）种类和检测指标（介素类、因子类）及标本数量（48T/96T）告知我司业务人员即可。在接到客户标本当日起，3周内将检测报告交到客户手中！

elisa实验技术服务质量：基尔顿生物提供的检测用所有试剂，适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本，灵敏度极高。

注意事项：在收集标本前都有一个完整的计划，清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本：切割标本后，称取重量。加入量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

 ELISA实验步骤：

1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4ºC过夜，洗净。

2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37ºC1h，洗净。

3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37ºC 30分钟，洗净。

4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37ºC 40分钟，洗净。

5.显色：TMB显色

A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.

B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液：2N硫酸

A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。

6.450nm 波长测OD值

目前，基尔顿生物科技（上海）有限公司，主营实验技术服务、SCI服务、动物模型构建、细胞株、elisa试剂盒等，欢迎广大科研爱好者前来咨询选购！

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途