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Thermo ScientificTM 公司的TMT (Tandem Mass Tag) 标记定量技术和AB SCIEXTM公司的iTRAQ技术都属于二级报告离子定量技术,具有相似的原理(图1):提取样品中的总蛋白并酶解为多肽,多肽N-term以及末端Lysine侧链基团的游离氨基能够与TMT标签进行共价结合,从而使每条多肽都带上至少一个TMT标签;不同TMT标签具有相同的分子量,但是却有不同的同位素分布,来自不同样品的相同多肽在MS1中同时被分离,经裂解后在MS2中释放出reporter,代表该多肽在对应样品中的相对含量。 TMT (iTRAQ) zei高可同时标记10 (8) 组不同的生物样品,且一次性完成全部样品的定性定量分析,显著的提高了实验通量,降低了定量误差,可发现更细微的生物学差异。
图1. TMT标签结构和定量原理。
技术优势
● 通量与深度的完美结合:在质谱本身高通量的基础上,TMT技术又进一步扩大了这种优势,相比SILAC、Dimethyl等标记定量技术,TMT可同时完成多至10个不同样品的定量分析;运用high pH反相HPLC分级为8个组分,每个组分再经low pH反相HPLC分离,两次正交液相分离,显著的提高了鉴定和定量深度。
● 特异性与灵敏度兼备:基于质谱的蛋白质组学精确到单个氨基酸位点,蛋白鉴定准确,灵敏度高,是profiling分析和PTM研究的强大工具。
● 严格的质量控制:数据稳定、重现性好,定量动态范围广,多个样品平行处理极大的降低了实验误差。
● 专业的数据分析:标准的搜库流程,专业的统计和生信分析,出版级的图表展示,完整全面的分析报告。
样品要求
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途