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Cast PCR(基于Taqman探针法的体细胞突变检测方法)
在癌组织中,与野生型DNA序列的高含量相比,体细胞突变往往只是微乎其微的量。在这样一个大量野生型等位基因存在的背景下检测这些稀有突变是相当具有挑战性的。现有的突变检测方法往往在灵敏度和特异性上受到很大限制,从而影响了癌组织中体细胞突变的检出率。基于TaqMan®技术的Cast PCR检测方法旨在解决这些限制,并且提供一个能够准确得量化肿瘤样品中特定基因位点突变率的方法。
Cast PCR的全称是竞争性等位基因特异的TaqMan聚合酶链式反应(competitive allele-specific TaqMan®polymerase chainreaction)。这是一种新颖的技术,它在扩增目的突变的同时,利用抑制因子来沉默样品中野生型等位基因的扩增。再加上LifeTech金标准的TaqMan探针和引物,从而实现了较高的灵敏度和特异性。因此Cast PCR可以用于从肿瘤细胞的DNA样本中筛选出极微量的突变基因。
Cast PCR的特点:
1. 高特异性 – 突变等位基因的检测是基于等位基因特异的引物,而野生型背景由MGB探针阻断剂寡核苷酸所抑制
2. 高灵敏度 – 可从高达100万个拷贝的野生型gDNA分子中检测出1-5个拷贝的突变分子。
3. 较广的动态范围和出色的PCR效率 – 动态范围高达7个对数期,而PCR平均效率为100 ± 10%
4. 样品类型兼容性好 – 您提供给我们的样品可以是石蜡样品、细胞、组织、血液甚至cfDNA。
突变分析可以根据实验需要选择以下两种方法:
1)定性分析:突变等位基因分析结合基因参考分析。这种方法使用zei少的孔、样本和试剂,能够确定样品中突变碱基存在与否。
2)定量分析:突变等位基因分析结合野生型等位基因分析。这种方法能够高度准确地定量样品中的突变比例。
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Cast PCR(基因低频突变检测服务)信息由上海杏园生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于Cast PCR(基因低频突变检测服务)报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
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