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MTT实验技术服务

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一、MTT实验技术服务(提供完整mtt实验步骤,mtt实验方法)
  MTT方法简介:
  四甲基偶氮唑盐比色法(MTT方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲月替(Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜(DMSO)溶解,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其吸光度OD值,OD值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性。

  目前MTT法常用于以下几个方面的研究:
  1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。
  2、体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,没有***性,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。
  3、一些细胞因子活性的研究
  主要实验步骤如下:
  1)将对数生长期细胞用胰酶消化后配制成浓度为1-10×104个/ml的细胞悬液,按1000-10000个细胞/孔接种于96孔板,每孔加100μl。
  2)将平板置37℃、5%CO2湿度培养箱中24小时后,加入含有不同浓度受试样本的培养液100μl,每个样本不同浓度设平行的三个孔,对照组加不含样本的培养液100μl,再放入培养箱中孵育24-72小时,
  3)用快速翻板法倒掉培养液,每孔加入用无血清1640按5mg/ml新鲜配制的MTT溶液100μl,温育4小时,使MTT还原为甲月替,再次倒掉上清液,每孔加DMSO(二甲基亚枫)200μl,用平板摇床摇匀后,使用酶标仪测定光密度值(OD)(参考波长450nm,检测波长570nm),以溶剂对照处理细胞为对照组,按下述公式计算化合物对细胞的抑制率,并按中效方程计算半数抑制浓度IC50。

  客户方需提供:
  样本描述,相关的实验设计内容如作用时间和样本浓度等。
  公司方提供:
  实验结果IC50值。
  实验周期与费用:
  实验费用以样本数和细胞株的种类数目为单位计算,实验周期为20个工作日,公司将在材料和预付的实验经费全部到位的工作日后30个工作日之内提交实验结果。

MTT实验技术服务信息由上海迪奥生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于MTT实验技术服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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