稳定细胞株筛选服务

 简介   

建立稳定的细胞系，是对靶细胞进行筛选，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，zei常用的真核表达基因载体的标志物有嘌呤霉素(puromycin)、潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin），常用puro、G418进行选择性筛选。筛选得到的细胞可稳定表达目的蛋白，可以用于蛋白的扩增和富集，或者得到稳定沉默特定基因的细胞株。传统的方法是直接转染DNA质粒后，进行药物筛选，该方法费时费力，假阳性高。目前汉恒生物公司已经淘汰了传统的直接转染DNA质粒筛选稳定株的方法，利用慢病毒可以整合到细胞基因组的特性，采用效率更高的慢病毒感染的筛选方法。

实验流程

首先构建带有抗性标志的慢病毒载体，包装慢病毒颗粒。同时使用相应的药物，并对所需筛选的细胞进行药物浓度测试，选择细胞全部凋亡时药物的zei低浓度。感染病毒后，在该浓度条件下进行筛选。10-14天后，挑取单克隆，扩增后通过RT-PCR检测mRNA表达情况或客户提供靶基因特异性抗体，汉恒生物提供Western Blot检测，根据蛋白表达情况，进一步筛选出稳定细胞株。

服务介绍

汉恒生物目前已经构建近300多种稳定细胞株，包括带有不同荧光蛋白：GFP，RFP，LUC等等。针对具有荧光标记而没有抗性标记的慢病毒载体，汉恒生物可以采用慢病毒感染，使用流式细胞仪分选的方式富集感染阳性的细胞。

汉恒生物有着多年构建稳定细胞株的经验，已在RAW264.7、U87-MG、CHG-5、HUH7、H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad 、GIST-T1、HEK293、293T等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。

汉恒生物实例

 U87-MG

CHG-5（RNAi）

稳定细胞株筛选服务信息由汉恒生物科技（上海）有限公司为您提供，如您想了解更多关于稳定细胞株筛选服务报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途