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流式检测细胞周期(PI)

参考报价: ¥75-85 RMB(人民币) 型号: 流式检测细胞周期(PI)
品牌: 威斯腾 产地: 重庆
关注度: 450 信息完整度:
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AI问答
可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?

细胞周期的定义


生命是从一代向下一代传递的连续过程,因此是一个不断更新、不断从头开始的过程。细胞的生命开始于产生它的母细胞的分裂, 结束于它的子细胞的形成,或是细胞的自身死亡。通常将通过细胞分裂产生的新细胞的生长开始到下一次细胞分裂形成子细胞结束为止所经历的过程称为细胞周期。在这一过程中,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。


PI染色的检测:

PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。


1)PI单染色的固定方法:

1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。

2.3ml PBS洗一次。

3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。

4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。

5.400目的筛网过滤1次,500~1000r/min离心5min,弃去PBS。

6.用1ml PI染液,4℃避光30min。

7.流式细胞仪检测:PI用氩离子激发荧光,激发光波波长为488nm,发射光波波长大于630nm,产生红色荧光,可分析前散射光对侧散射光的散点图及PI荧光的直方图。


材料:

1、 PI(e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA)

2、 缓冲体系:1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scientific,Santa Ana,CA)+2%新鲜小牛血清+0.1%叠氮钠

A、  PI缓冲液

用缓冲液将PI溶解至终浓度为1mg/ml中,于4℃下密封避光保存1个月。

B、  PI浓缩液

用缓冲液将PI溶解至终浓度为500mg/ml,于4℃下密封避光保存。我们已经检测过将PI浓缩液放置数月后,并无观察到染色活性的丢失。


Ⅱ、方法:

将样品细胞按程序描述的方法用FITC标记的单克隆抗体进行单色染色。

A、  在最后的洗涤步骤后,将样品细胞悬浮于PI缓冲液中,于4℃下密封避光保存以备通过流式细胞仪分析;

B、  在最后的洗涤步骤后,如前述将样品细胞悬浮后备用。如果您想检测样品细胞活力,在每一管中加入2μl的PI浓缩液,混匀。将样品置于4℃下密封避光保存以备流式细胞仪分析。


完成时间:

接到样本1月以内。


威斯腾实验服务流程


 

威斯腾生物服务项目

分子生物学检测蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP)多克隆抗体制备抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术Western-blot 实验服务脊髓损伤模型
生化指标检测蛋白双向电泳实验服务脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测原核蛋白表达纯化骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP)真核蛋白表达纯化心肌缺血模型
GST pull DownITRAQ定量蛋白质组学心力衰竭模型

SILAC蛋白组学肺动脉高血压动物模型


高血压模型
病毒包装实验课题整体外包粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化整体课题外包大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化细胞整体实验外包慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化动物整体实验外包过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化
肺炎大鼠模型


肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代细胞培养肝纤维化模型
细胞因子芯片骨髓间充质干细胞培养胆结石模型
BioPlex悬浮芯片脂肪干细胞培养急性胰腺炎模型
生长因子芯片心肌成纤维细胞培养急性肾衰竭模型
炎症因子芯片软骨细胞培养体内血栓模型
血管生成因子芯片血管内皮细胞培养关节炎模型
凋亡因子芯片神经元细胞培养I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片内皮组细胞原代培养裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片
基因编辑动物

电生理相关服务动物整体实验服务

膜片钳实验
细胞生物学检测高通量测序代谢组学
细胞原代培养mRNA测序气相色谱GC/MS
MTT检测LncRNA测序液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测全基因组测序核磁共震NMR
细胞周期检测RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验外显子测序影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭16s扩增子测序Micro-CT
流式分选Small RNA测序小动物活体成像
CCK8/XTT检测宏基因组测序核磁共振
台盼蓝检测细胞活性单细胞测序PET-CT
药物筛选细胞学实验circleRNA测序
细胞粘附性检测甲基化测序基因编辑动物
细胞划痕实验
条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验
全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验

病理检测CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入基因芯片
扫描电镜基因定点突变细胞系LncRNA芯片
透射电镜单基因敲除细胞系miRNA芯片
HE染色多基因敲除细胞系mRNA芯片
免疫组化目的基因敲入细胞系甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测报告基因敲入细胞系SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光

Masson染色CRISPR/Cas9动物敲除/敲入科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交基因敲除大鼠/小鼠科研文献论著翻译
荧光原位杂交基因敲入大鼠/小鼠论文翻译润色服务
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等)
临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测药物筛选服务项目药效学评价
旷场实验高通量自动药物筛选平台抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测细胞高内涵药物筛选平台心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测蛋白质组学靶标研发平台泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳分子药理研究平台内分泌系统药物药效学评价

生物膜片钳药物筛选平台抗炎免疫药物药效学评价

常规药物体外筛选


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