您好,欢迎您查看分析测试百科网,请问有什么帮助您的?

稍后再说 立即咨询
江苏齐氏生物科技有限公司
400-6699-117转1000
热门搜索:
分析测试百科网 > 威斯腾 > 细胞生物学检测 > 流式细胞术检测细胞凋亡
流式细胞术检测细胞凋亡
参考报价: 面议 型号: 流式细胞术检测细胞凋亡
品牌: 威斯腾 产地: 重庆
关注度: 78 信息完整度:
样本: 典型用户: 暂无
咨询留言 在线咨询

400-6699-1171000

流式细胞术检测细胞凋亡


细胞早期凋亡检测方法Annexin V

备用试剂
1. 结合缓冲液(10X ): 0.1 M HEPES, pH 7.4; 1.4 M NaCl; 25 mM CaCl2 . 稀释到1X 工作液备用;
2.碘化丙碇Propidium Iodide (PI).   用PBS稀释到50 μg/ml备用,建议与Annexin V-FITC联合使用;

3. 7-AAD. 推荐与Annexin V-PE或者Annexin V-Biotin 联合使用;
4. 1X PBS  室温储存备用;


染色步骤
1、用预冷的PBS洗涤细胞两次,之后用1X的结合缓冲液重悬细胞, 调节细胞浓度到1X106Cells/ml;
2、取100μl调节好浓度的细胞悬液到5ml流式管底部;
3、加入Annexin V标记蛋白和相应的核酸染料(标记的Annexin V与核酸染料均需要摸索到合适的使用浓度,商品化试剂盒按照说明书操作);
4、均匀混合,室温避光反应15分钟;(若是用Annexin V-Biotin标记蛋白染色,反应后用1X的结合缓冲液洗涤细胞一次,再加入合适浓度的标记链霉亲和素Streptavidin,再加入合适的核酸染料,室温避光反应15分钟)
5、向流式管中加入400μl 1X的结合缓冲液,重悬后及时上流式细胞仪进行分析.


操作注意事项

1、补偿对照管很重要;
2、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞;
3、细胞浓度与染色用的蛋白量要合适;
4、对不同药物浓度和药物作用时间要进行摸索;

 

仪器:

实验所用的流式细胞仪为COULTER EPICS XL。


样本要求:

1)单个细胞:1~2×106 个细胞左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。

2)外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。

注:

1、 部分常用荧光探针,如PI等,我公司可免费提供,;特殊标记物,如CD抗体等,用户须另行购买,也可委托我公司代购;用户所提供抗体应可与样本发生特异性识别反应。

2、由用户提供的样品或试剂所致的实验问题由用户负责。


附:流式细胞术检测样品推荐制备方法:

细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品(PI染色)的制备:

(1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。

(2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小时。

(3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。

(4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNase A终浓度为20微克/毫升。


威斯腾实验服务流程


 

威斯腾生物服务项目

分子生物学检测 蛋白质与免疫学 动物实验
实时荧光定量PCR 单克隆抗体制备 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗体制备 抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 Western-blot 实验服务 脊髓损伤模型
生化指标检测 蛋白双向电泳实验服务 脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测 原核蛋白表达纯化 骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表达纯化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白质组学 心力衰竭模型
SILAC蛋白组学 肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装 实验课题整体外包 粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化 整体课题外包 大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化 细胞整体实验外包 慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化 动物整体实验外包 过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代细胞培养 肝纤维化模型
细胞因子芯片 骨髓间充质干细胞培养 胆结石模型
BioPlex悬浮芯片 脂肪干细胞培养 急性胰腺炎模型
生长因子芯片 心肌成纤维细胞培养 急性肾衰竭模型
炎症因子芯片 软骨细胞培养 体内血栓模型
血管生成因子芯片 血管内皮细胞培养 关节炎模型
凋亡因子芯片 神经元细胞培养 I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片 内皮组细胞原代培养 裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 基因编辑动物
电生理相关服务 动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测 高通量测序 代谢组学
细胞原代培养 mRNA测序 气相色谱GC/MS
MTT检测 LncRNA测序 液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测 全基因组测序 核磁共震NMR
细胞周期检测 RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验 外显子测序 影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭 16s扩增子测序 Micro-CT
流式分选 Small RNA测序 小动物活体成像
CCK8/XTT检测 宏基因组测序 核磁共振
台盼蓝检测细胞活性 单细胞测序 PET-CT
药物筛选细胞学实验 circleRNA测序
细胞粘附性检测 甲基化测序 基因编辑动物
细胞划痕实验 条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验 全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测 CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 基因芯片
扫描电镜 基因定点突变细胞系 LncRNA芯片
透射电镜 单基因敲除细胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除细胞系 mRNA芯片
免疫组化 目的基因敲入细胞系 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测 报告基因敲入细胞系 SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色 CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交 基因敲除大鼠/小鼠 科研文献论著翻译
荧光原位杂交 基因敲入大鼠/小鼠 论文翻译润色服务
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等) 临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测 药物筛选服务项目 药效学评价
旷场实验 高通量自动药物筛选平台 抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测 细胞高内涵药物筛选平台 心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测 蛋白质组学靶标研发平台 泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳 分子药理研究平台 内分泌系统药物药效学评价
生物膜片钳药物筛选平台 抗炎免疫药物药效学评价
常规药物体外筛选


流式细胞术检测细胞凋亡信息由江苏齐氏生物科技有限公司 为您提供,如您想了解更多关于流式细胞术检测细胞凋亡报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

流式细胞术检测细胞凋亡 - 产品推荐
移动版: 资讯 直播 仪器谱

Copyright ©2007-2023 ANTPEDIA, All Rights Reserved

京ICP备07018254号 京公网安备1101085018 电信与信息服务业务经营许可证:京ICP证110310号