腺病毒/RNAi/基因过表达服务

慢病毒，腺病毒，RNAi/基因过表达服务

慢病毒包装

威斯腾生物（Western Biotechnology）专业实验平台是目前较为先进，实验技术齐全的平台和国内外多家知名研究院所合作，为国内6000多家客户提供专业技术服务。威斯腾生物平台的慢病毒技术是国内做得最早，质量最稳定的产品，专业技术团队，标准化生产流程，严格的质量把控，本平台为您提供慢病毒载体构建，慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建，后续功能验证的体外和体内实验等相关服务。

慢病毒（Lentivirus）具有感染谱广泛，可以有效感染分裂期和静止期细胞，长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达，RNA干扰，microRNA研究以及活体动物实验中。

慢病毒载体系统为4质粒系统，包括pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G和目的穿梭质粒。其中穿梭质粒（目的穿梭质粒）含有eGFP（能表达绿色荧光蛋白），pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G含有病毒包装所必须的元件。

慢病毒载体的优越性:

基于HIV的慢病毒载体（Lentiviral Vector）能有效地感染分裂细胞和非分裂细胞，比传统的逆转录病毒载体应用范围广。与脂质体转染相比，慢病毒感染具有更高的效率； 能高效地将目的基因转导入体内和体外培养的细胞中去；能够稳定地长期地表达目的基因，优于腺腺病毒载体；由于更换了膜蛋白（VSVG），宿主范围相当广泛。通过合理设计极大的加强了其安全性，没有产生复制型慢病毒的可能性，安全性考来自其整合特性。

【服务项目】

一、慢病毒载体构建服务

1.1  Western Biotechnology可为您构建包括eGFP、RFP、puromycin、neomycin等各种标签的慢病毒基因过表达载体和RNA干扰载体，可以为客户的实验设计提供丰富的选择方案。

1.2 本平台还可以根据客户需要对载体的启动子和表达框进行改造，实现组织特异性或调控表达的特殊需要。

二、RNAi慢病毒系列服务

2.1 siRNA化学合成。

2.2重组慢病毒shRNA慢病毒质粒构建。

2.3定制shRNA慢病毒构建与包装服务(已知有效靶序列)。

客户需提供已通过文献查询或实验证明的有效靶点序列信息的 shRNA的序列.我们按照客户要求完成shRNA慢病毒产品的制备，可以提供慢病毒shRNA质粒和shRNA慢病毒产品等。

定制RNAi慢病毒产品可直接用于细胞系，原代细胞，干细胞，动物组织等的感染，表达shRNA。

* Easy shRNA慢病毒构建与包装服务

腺病毒包装

腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70～90 nm的颗粒，由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7～9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子，约含35 000 bp，两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5，端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合，可以出现双链DNA的环状结构。人体腺病毒已知有33种，分别命名为adl～ad33，研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA，已知的转录单位至少有5个：正Ⅰ区位于病毒基因组左侧，可再分成正ⅠA和正ⅠB，与细胞转化有关；正Ⅱ区编码DNA结合蛋白，参与病毒的复制；正Ⅲ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白；正Ⅳ区位于ad2基因组右端，受正Ⅱ区编码的DNA结合蛋白质调控；第5个转录单位在病毒感染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。 
腺病毒特性：
威斯腾生物腺病毒表达系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架，在克隆、包装、扩增等各部分条件做了改进和优化，达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上，提供各种带有不同报告基因、不同标签的重组腺病毒载体服务。同时我们还可以根据客户需要完成各种较高难度的载体构建，如双基因载体构建，具有细胞毒性作用基因的腺病毒载体构建等。所得到的毒液可以用于信号转导、基因转位、Co-IP、动物实验、干细胞研究等科研实验。
我们的服务：
（1）表达目的基因的重组腺病毒载体构建服务（最大插入片段5kb）
（2）超大量及超高滴度的重组腺病毒扩增和纯化服务
（3）重组腺病毒载体的鉴定
（4）shRNA基因沉默效应验证
（5）表达shRNA的重组腺病毒载体的构建服务
（6）构建各种带不同标签和不同报告基因的腺病毒载体
（7）可调控表达的重组腺病毒载体
（8）目的基因的克隆，或者定购
（9）质量控制
服务承诺
（1）我们承诺从得到cDNA到完成纯化的服务时间将在70个工作日内完成
（2）我们承诺所提供的病毒毒液的滴度在1011PFU/ml以上（纯化后），总量不少于1012 PFU/ml
（3） 所提供的毒液量：2～3ml
（4） 可以包装任何有细胞毒性作用的基因；保证100%的包装成功率

威斯腾实验服务流程

威斯腾生物服务项目

【本平台合作项目】 

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除&敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途