慢病毒RNAi干扰服务

慢病毒是逆转录病毒的一种，具有逆转录病毒的基本结构，但也有不同于逆转录病毒的组份和特性，作为基因治疗载体发展起来，zei近已用于转基因动物制备。利用慢病毒构建的shRNA/miRNA载体，与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的shRNA相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，lentivirus－shRNA/miRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。

（1）服务流程
1）含目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和纯化提取。
2）慢病毒干扰载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞。
3）培养48~72h，收集培养上清。
4）病毒的纯化和浓缩（超离和/或超滤）。
5）滴度测定、目的基因检定。
6）将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞，筛选混合稳定细胞株，并检测靶基因的表达。

（2）客户提供
1）表达miRNA/shRNA的质粒（提供测序图谱）或所要干扰的靶基因的名称、序列
2）所需要的病毒滴度及总量，病毒是否需要纯化
3）若需要检测靶基因的表达变化，如需要请提供相应的抗体

（3）我们提供
1）提供重组后的慢病毒载体质粒
2）提供已测定好滴度、可以直接进行后续分析的慢病毒储存液

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途