DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧***转变为5-甲基胞嘧***（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧***是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是zei主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。
我们利用重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧***脱氨基转变成尿嘧***，而在适当的实验条件下甲基化的胞嘧***保持不变，再进行PCR扩增，甲基化的位点可以被当作一个C/T的SNP来处理；可利用直接测序法来判断是否CpG位点发生甲基化。

实验原理

    DNA甲基化存在于大多数真核生物中，一般发生在CpG双核苷酸中胞嘧***的5’UTR区，起调控作用。CpG的胞嘧***大概有80%被甲基化，20%处于基因调控区的CpG岛中。BSP甲基化测序（Bisulfite Genomic Sequencing PCR）的原理通过对基因组DNA进行重亚硫酸盐处理，非甲基化的胞嘧***被脱氨基而转变成尿嘧***，在随后的PCR反应中尿嘧***转变成胸腺嘧***，而甲基化的胞嘧***不能被脱氨基，在反应完成时被保留，我们将扩增得到的PCR产物进行TA克隆测序，就可以分析甲基化发生的具体情况。该方法实验结果准确性高，是甲基化检测的金标准。

实验流程

更多整体实验方案请登录公司官网www.research-bio.com
技术服务与咨询：021-64197338
扫一扫，更多活动尽在其中！

甲基化分析信息由上海锐赛生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于甲基化分析报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途