如何延长反相色谱柱的使用寿命？

对于反相纯化技术来说，由于碳链（C4、C8、C18）的加持，疏水化合物会与亲脂固定相相互作用，随着溶剂极性的降低而逐个洗脱，避免了强极性的死吸附，使得其拥有非常广泛的样品适用性，应用范围比我们常见的正常硅胶柱更加广泛。

反相色谱柱往往都是可以反复使用，而随着多次使用后，强亲脂性化合物会由于疏水性的作用部分结合到固定相填料上，随着时间的推移，堆积会越来越多，最终影响到色谱柱的柱效以及相应的使用寿命。因此在长时间的使用过程中，保持色谱柱的洁净变得异常重要，这样可以保证柱效，延长使用寿命，那么我们该如何延长反相色谱柱使用寿命，降低使用成本呢？今天我们将为大家分享一些有用的技巧。

1.  每次纯化结束后，请使用100%的强溶剂(通常是甲醇或乙腈)冲洗色谱柱。或者也可以用更强的溶剂(丙酮、THF、EtOAc)清洗，但一定要转换成你的主要有机溶剂 (甲醇或乙腈)

2. 处理清洗纯化前混合物，清除可能的强结合化合物

a. 可以通过固相萃取小柱进行液液萃取，使用一次性的疏水性小柱即可完成(图 1)

图1.带有疏水性滤片的小柱可以将水相和有机相自动分离，无需人工干预。

b. 也可以使用固相萃取小柱 (SPE), 图2

图 2. 固相萃取是在反相色谱之前去除强结合亲脂化合物的一个很好的工具。

3. 使用干法上样方法去除强结合亲脂性杂质，保证下方色谱柱寿命。注意：此时干法上样所使用填料须为反相填料。

图3. 通过外接的DLV干法上样器，保护下部色谱柱，防止被受污染。

4. 如使用缓冲盐做流动相，结束后，请使用含水的流动相冲洗色谱柱，清洗残留的缓冲盐，之后再使用纯有机溶剂润洗整根柱子。

5. 纯化清洗结束后，请使用纯有机溶剂（乙腈或者甲醇）保存色谱柱，两端堵住，密封保存，千万不可让色谱柱填料变干。

以上我是为大家提供了一些关于如何使用以及延长反相色谱柱的使用寿命的建议。您有其他的建议吗？欢迎下方评论和我们一起讨论。