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EASY-nLC 1200纳升级UHPLC液相色谱仪 内标掺入SILAC法用于小量组织的蛋白质组及磷酸化蛋白质组定量
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参考报价: ¥50万-100万 RMB(人民币) 型号: EASY-nLC 1200
品牌: 赛默飞 产地: 美国
关注度: 66 信息完整度:
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赛默飞液相色谱仪EASY-nLC 1200参考多项行业标准Lacy, P.E. and M. Kostianovsky, Method for the isolation of intact islets of Langerhans from the rat pancreas. Diabetes, 1967. 16(1): p. 35-9.。完成大鼠胰岛的检测。可以用在蛋白行业领域中的小量组织的蛋白质组,磷酸化蛋白质组项目。

  在这篇工作中,我们采用内标掺入 SILAC 的定量方法对大鼠胰岛进行了蛋白质组以及磷酸化蛋白质组的定量研究。通过对 SILAC 培养基的成分比例调整,我们优化了 INS-1E 细胞的标记方法。胰岛内包含多种细胞类型,如α细胞,β细胞,δ细胞等,我们发现采用 INS-1E 细胞系(一种β细胞系)已经可以较好的覆盖胰岛的全蛋白质组和磷酸化蛋白质组。若关心胰岛中的α细胞的话,则可以标记α细胞系来作为内标掺入胰岛。此外,我们还可以采用多种细胞系作为内标,这种称为“Super SILAC”的方法来完成对复杂组织蛋白质的全覆盖。
  在磷酸化蛋白质组学流程中,我们采用了自制的基于StageTip 的TiO2萃取小柱来灵活的实现小量样品的磷酸化肽段富集。样品量始终是磷酸化以及其他一些翻译后修饰研究绕不过去的话题,一般来说只有增加样品量,并采取适当的预分级手段才能更深度的去覆盖这些翻译后修饰蛋白质组。ThermoFisher 也提供了商业化的 IMAC 试剂盒(Cat # 88300),鉴于 IMAC 和 TiO2 对磷酸化肽段富集有着较好的互补性,这两者联用会对磷酸化蛋白质组的深度覆盖达到更好的效果。

Thermo ScientificTM EASY-nLC 1200TM 是纳升级LC系列产品EASY-nLC家族中的zei新成员。该系统具有在更高高压(1200bar)条件下分离生物分子(比如蛋白质和肽)的独特性能。这款仪器使用极其简便,可与一系列Thermo ScientificTM 质谱仪系统无缝连接以直接执行安全可靠的检测。


EASY-nLC 1200可以利用含1.9 μm 填料的75 cm长 UHPLC色谱柱上更短的梯度,表现了出色的分离能力,得到非常尖锐的谱峰。该系统先进的设计使其通过更高的压力以及微珠尺寸和柱长的变化,使蛋白质和肽的识别率提高了10%。而识别率的提高对于蛋白质组学研发具有非常重要的意义。EASY-nLC 1200在Thermo ScientificTM XcaliburTM 软件平台上运行,可与全系列的Thermo Scientific LC-MS系统轻松连接。

EASY-nLC 1200的更高的操作压力范围显著缩短了分析周期,其设计旨在通过加速上样和柱重新平衡的过程提高分析效率。简明的一体化配置方便而耐用。

1. 高级流速控制

·  智能流速控制(IFC)加快上样和平衡的速度,并防止色谱柱阻塞

· 高级流速控制(AFC)保证流速的精度,提供出色的样品间重复性


2. 内置计算机& 维护

· 自动检漏表明实际泄漏的位置

·  进样前自动气泡检测,防止损失样品

· 系统背压测试快速检测流路阻塞情况

· 自动化的内置维护步骤

· 通过网络远程访问,解决系统问题

· 疑难问题的事件日志

·  系统定期维护时间提醒

 

3. 集成设计

· 设计结构有利于组件更换

· 无脉冲泵zei大程度减少密封垫、阀门和接头的更换

· 软件利用优化的流动路径

·  使用免维护切换阀,无需更换转子

 

4. 稳定的无脉冲梯度

· 工厂配置的流动路径zei小化工作容量

· zei佳色谱准确性:不分流梯度混合,逐步控制的纳升级注射泵以及流动相的流速传感器控制


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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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