在线二维柱切换 - 高效液相色谱法同时测定婴幼儿强化 奶粉中维生素 A、D3、E 的含量

关键词：

高效液相色谱；维生素 D；维生素Ａ；维生素Ｅ；二维色谱；婴幼儿配方奶粉

引言

婴幼儿配方奶粉又称为母乳化奶粉，是一种以牛乳（或其他动物乳）为主要原料，通过调整成分模拟母乳， 可供婴幼儿生长和发育所需要的一种人工食品 [1]。根据国家标准中奶粉营养成分有关规定，维生素指标中必 须强化的包括维生素 A、维生素 D 和维生素 E 及其他水溶性维生素等；其中维生素 D 在实际母乳中含量极低， 约为 4–40 IU（国际单位）/L（0.1–1.0µg/L）[2~4]，主要对应形式为维生素 D3 和 25-OH 维生素 D3 [4~5]，因此通 常将维生素 D3 制成水可分散性的微粒形式，添加到婴幼儿强化奶粉中 [5~6]。关于奶粉中维生素 A、D 和 E 的 测定方法，文献报道较多，其中高效液相色谱法是常用的分析方法。由于样品基质复杂，三种维生素对温度、 光照、氧气和极端的 pH 值较敏感，且多数经过包被后再添加到食品基质中 [7]，因此分析方法常包括皂化破壁、 有机溶剂萃取，浓缩和净化等步骤 [8~9]，在现行标准分析方法中 [9] 需采用正相制备色谱、反相分析色谱两套仪器，分别进行净化制备和分析，前处理过程极其繁琐，大大影响样品分析效率。 本文首次采用在线二维柱切换 - 高效液相色谱紫外检测法，样品经过皂化、萃取后，直接进样，同时完成维生素 A、D 和 E 的分析测定，提高了方法的准确性和样品分析效率。

测试条件

仪器：Ultimate DGP 3600 系列，包括带有在线脱气单元的双三元梯度泵；带有两个六通阀的柱温箱；紫外检测器。

可行性分析

本文建立了在线二维柱切换 - 紫外检测法测定婴幼儿配方奶粉和乳品中维生素 A、D3 和 E 的含量测定方 法，本方法具有以下特点：

（1）二维分离方法可以减少色谱峰重叠现象。在维生素 D3 测定中，利用一维和二维色谱柱分离选择性 差异，可以更好的降低复杂基质成分对维生素 D3 测定的干扰。 

（2）与国标方法比较，本方法可减少正相色谱的净化过程，一次进样同时测定脂溶性维生素 A，E 和 D3 的含量，大大提高了样品的分析效率。

（3）在检测方法选择上，紫外检测器和电化学检测器是应用较多的两种检测器。质谱检测器在复杂基 质样品中对痕量组分的定性和定量上具有优势，在婴幼儿奶粉检测中应用也越来越多。本文立足于方法的普 适性，选择紫外检测器，利用其波长切换方式，同时分析维生素 A，E 和 D3，通过一个六通切换阀，实现检 测器的共用，所有过程在软件支持下，可以实现全自动化控制。 作为二维分离方法，相对于常规分析，仍较复杂，影响测定结果的因素较多。今后本实验将继续扩大样 品分析范围，考察方法耐用性，并开展联合实验室的验证工作，以完成对方法的综合评价。