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同样数细胞,为什么每个人数出来的结果都不同?

发布时间: 2022-12-13 19:24 来源:广州牛顿光学研究院有限公司

牛顿光学

智能成像,一步到位!


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Preface


       细胞计数是大部分生物人的日常。不论是细胞培养(比如传代,冻存),亦或是准备细胞用于下一步实验(比如转染),数细胞都是一件有些折磨的小事,但也是一件必不可少,非常重要的小事。细胞计数不正确,无法给细胞最优的生长环境,还可能导致加大下游实验的误差。


       在对细胞的浓度及活率进行测量时,你是否会遇到同样的状况:明明同一板细胞,为什么每个人测量出来的结果都不一样?为什么我自己数了几次差异都比较大?注意以下几点,能在细胞计数上有很大帮助。


01

细胞计数前的准备工作

       上样的样本室要擦拭干净,或自动计数仪的计数板要保持表面洁净。任何污染都可能导致不准确的结果。对于手动细胞计数,则需要移除和清洁盖玻片,并用70%的乙醇和水清洗计数室。图片关键词

图片关键词


02

细胞样品的制备

       很多情况下计数结果不稳定,都是由样品的不均匀性造成的。此时可以在加入细胞样品前使用涡旋震荡法或“手指轻弹”的方法摇匀细胞样品,并使用移液枪吹打细胞样品。按照上述方法混合样品后,无论从试管中间还是试管底部得到的细胞浓度都是一致的。
       避免细胞碎片、杂质的产生,测量活率时,台盼蓝溶液长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,这时可在37℃水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。




03

机器参数的设置

       无论你使用的牛顿光学Cyto系列自动细胞计数仪,或是其他品牌的自动细胞计数仪,还是显微镜+血球细胞计数仪的手动组合,以下仪器相关设置都是至关重要的:

·一致的照明

·正确的对焦

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(错误对焦示范图)

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(正确对焦示范图)


       对于以上的影响因素,牛顿光学Cyto系列全自动细胞计数仪提供了很大的便利性,配备了自动对焦和自动照明功能,优化每个样品的对焦和照明,清晰圈出成图从而消除了人为引入的可变性,减少对计数结果准确性的影响。同时牛顿光学Cyto系列全自动细胞计数仪可以有效的区分细胞杂质;碎片等干扰,也能对较小的细胞进行精准的计数。

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(区分细胞碎片;杂质等干扰)

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(牛顿光学CytoEasy对PBMC细胞圈出情况)


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01

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