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参考报价: | 面议 | 型号: | circRNA测序 |
品牌: | 集思慧远 | 产地: | 南京 |
关注度: | 14 | 信息完整度: | |
样本: | 典型用户: | 暂无 |
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circRNAs(Circular RNAs,环状RNA)是一类不具有5' 末端帽子和3' 末端poly(A)尾巴、并以共价键形成环形结构的非编码RNA分子。circRNAs广泛存在于人和动植物中,是一类新的隐秘未知但却功能异常强大的非编码RNA。不同于线性RNA,circRNAs呈封闭环状结构,不受RNA外切酶影响,表达更稳定,不易降解。这种特性,预示circRNAs有巨大潜力成为新的临床诊断标志物。
最近的研究证实,circRNAs是ceRNA调控网络中的重要成员,可以像“海绵”一样大量吸附miRNAs,进而调控基因表达。然而,circRNAs隐秘的更强大的功能远未被发掘和阐释。
技术优势
◆ 文库优化:采用核糖体去除、链特异性文库构建、以及RNase R消化方案,既能获取完整的环状RNA和线性RNA序列,也可以仅保留环状RNA序列。
◆ 分析全面:全面分析和鉴定样本环状RNA和长链线性RNA(包括mRNA和lncRNA)。
◆ 方案系统:从circRNA发掘与表达分析,环状RNA与长链线性RNA互作分析,到ceRNA调控机制探析,由研究人员自由选择研究方案。
产品优势:
分析内容全面:不限于对已知circRNA的研究分析,并设置严格的筛选条件预测新的circRNA;
数据信息量大:可一次性获得样本中几乎所有的circRNA信息,有利于提高后续分析结果的准确性和全面性;
测序物种多元:对包括人类、动植物在内的许多物种的circRNA进行鉴定和分析;
技术路线:
1.测序数据及其质量控制:
测序碱基质量值
测序数据产出统计
2.circRNA鉴定:
CircRNA的长度分布
CircRNA 的来源统计
已知CircRNA的注释
3.CircRNA的表达及差异表达:
CircRNA的表达水平分析
CircRNA差异表达分析结果
差异表达CircRNA筛选、
差异表达CircRNA聚类分析
4.差异CircRNA来源基因富集分析:
差异CircRNA来源基因的GO分类
差异CircRNA来源基因的GO富集层次分析
差异CircRNA来源基因的COG注释、
差异CircRNA来源基因KEGG注释
差异CircRNA来源基因KEGG通路富集分析
样品要求:
1. 样品类型:总RNA;
2. 样品浓度:≥200 ng/ul;
3. 样品总量:≥10ug;
4. 样品纯度:OD260/280为1.8~2.2,OD260/230≥1.0,260nm处有正常峰值;无基因组DNA污染;
5. RNA完整性:电泳检测28S/18S≥1.5。(据送样日最近的电泳结果)
1、植物中的非编码circRNA
用公共的RNA-Seq数据对水稻和拟南芥中的circRNA进行了全基因组鉴定,分析并比较了植物和动物circRNA的特征。在水稻和拟南芥中分别鉴定了12037和6012个circRNA,实验验证了56%(10/18)的样品水稻中的外显子环状RNA。超过700个外显子circRNA的亲本基因是水稻和拟南芥之间的直系同源物,表明在植物中circRNA是保守的。内含子侧翼的植物circRNAs比线性基因的内含子长得多,比动物circRNAs拥有较少的重复元素和反向互补序列。植物circRNAs表现出不同的表达模式,27个水稻外显子circRNAs在磷酸盐富足和缺乏条件下差异表达。观察到一些circRNA与其亲本基因的表达显着正相关。
植物中circRNAs的鉴定
2、追踪人植入前胚胎的circRNA表达量
环状RNA未在人植入前胚胎发育过程中有报道。本文系统分析了人卵母细胞和植入前胚胎细胞的circRNA和mRNA,使用SUPeP-seq。从2974个亲本基因中鉴定了10032个circRNA。大多数具有发育阶段特异性。其中部分是母系表达,暗示其在卵子发生和受精卵形成的重要调控作用。人类和小鼠胚胎的比较揭示了这两个物种的高保守性。与小鼠相比,人类植入前胚胎的circRNA更多,且人类circRNA跨内含子长度显着增加。还对RNA从头组装,鉴定新的转录单元,其中大部分都是潜在的lncRNAs位点。
植入前胚胎各时期基因的表达
参考文献:
1. Widespread noncoding circular RNAs in plants (New Phytologist, 2015, IF =7.210)
2. Tracing the expression of circular RNAs in human pre-implantation embryos (Genome Biology, 2016, IF = 11.313)
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途