三环抗抑郁剂固相萃取净化方法

3mL,Bond Elut Certifi 130mg. PN.12102051

三环抗抑郁剂固相萃取净化方法

1. 样品制备

A . 血浆或血清

用 1.0mol/L KOH 溶液调节 pH 值至 6.0 ± 0.5 1mL 血浆或血清中加入 4mL 100mmol/L磷酸盐缓冲液（ pH6.0 充分混合。

B. 全血

充分混合，1mL 血液中加入 2mL 甲醇。离心去除蛋白沉淀；

加入 10mL 100mmol/L 磷酸盐缓冲液（ pH6.0 充分混合，取上清液。将用 1.0mol/L KOH 溶液调节pH 值至 6.0 ± 0.5

2. SPE 净化

2mL 去离子水和 1mL 100mmol/L 磷酸盐缓冲液（ pH6.0 分别冲洗柱床； a. 活化：用 2mL 甲醇。

注意：要保证吸附剂不干燥；

b. 上样：上样流速控制在 1~2mL/min

1mL1.0mol/L 醋酸和 3mL 甲醇分别淋洗，c. 淋洗：分别用 3mL 去离子水。最后将 SPE 柱抽 5min至干燥；

d. 洗脱：用 2mL 二氯甲烷 / 异丙醇 / 氨水（ 78:20:2 以 1~2mL/min 速度进行洗脱。收集全部洗脱液；

注意：洗脱液必需为当天新制备的新鲜溶液。

3. 蒸发干燥

将洗脱液在 40 ℃ 以下旋转蒸发至干

4. 检测方法

GC-NPD 或者 GC-MS 分析

衍生化

70 ℃ 反应 20min 冷却至室温，用 50 μ L 乙酸乙酯溶解蒸发后的样品 加入 50 μ L 五氟丙酰酸酐（ PFPA充氮气并密封。蒸发至干； 100 μ L 乙酸乙酯定容

非衍生化方法

用 100 μ L 甲醇重新定容；进 1~ 3 μ L 测定； 没有衍生化的样品也可以直接进行分析。

LC 检测

用 200 μ L 乙腈 / 去离子水（ 25:75 定容，将第 3 步中的样品。用漩涡混合器混合 30 进 100 μ L测定。

5. 样品成分

三环抗抑郁剂

本方法中使用的固相萃取装置