众所周知，亚硝胺是一钟致畸致癌变的物质，导致了从2018以来的100多种化合物的召回，其中就包括阿昔洛韦。阿昔洛韦是一种用于治疗带状疱疹和水痘的抗病毒感染的药品，在市场上应用十分广泛，因而其相关亚硝胺的标准显得十分重要。目前美国FDA已经修改了亚硝胺含量标准，对药品来说目前限度为30ng/g,相当于每日最大剂量为880mg/天。
鉴于亚硝胺在阿昔洛韦中不可避免的存在，其含量的分析也成为研究人员必不可少的工作。本研究中给大家分享一种阿昔洛韦中10种亚硝胺杂质的定量方法。具体信息如下：
样品浓度：40mg/ml
加标样品浓度：40mg/ml，亚硝胺标品25ng/g
液相条件：
色谱柱：Luna® Omega 3.0 µm Polar C18
规格：150x3.0mm
货号：00F-4760-Y0
流动相：
A: 0.1%甲酸水
B: 0.1%甲酸甲醇
梯度：
时间（分钟） | B% |
0.00 | 2 |
1.00 | 2 |
20.0 | 98 |
22.0 | 98 |
22.1 | 2 |
24.0 | 2 |
流速：0.45mL/min
上样量：20µL
温度：35°C
检测器：MRM
质谱：SCIEX
MRM条件：
模式：APCI大气压化学电离
离子源温度：350°C
雾化气：45psi
吹帘气：35psi
碰撞活化解离：中等
雾化器电流：3µA
谱图及结果如下：
表1:定量分析结果：校准曲线均在0.025-20ng/mL范围内，相关系数均大于0.99，定量限研究均进行6次重复进样评估。总变异系数（CV）<20%，在定量限水平下，准确度在±20%以内
图1 10种亚硝胺杂质和阿昔洛韦原料药分离谱图
图2 10种亚硝胺杂质的定量校准曲线
图3 定量限下10种亚硝胺杂质谱图
图4 加标后的10种亚硝胺杂质谱图
表2 加标样品的准确度和变异系数
Compound | Accuracy(%) | CV(%) |
NDMA | 81.5 | 4.10 |
NDIPA | 87.5 | 1.90 |
NMEA | 80.5 | 3.90 |
NDEA | 84.3 | 3.30 |
NPYR | 82.1 | 10.4 |
NPIP | 83.9 | 2.30 |
NMPA | 84.5 |