看完才知道，原来磁珠检测可以更简单准确（下）

上篇我们介绍了磁珠性能及其检测方法（上期回顾），本篇我们将继续讲解如何使用库尔特法来进行磁珠的粒径和浓度控制。

测试条件

使用仪器型号：贝克曼库尔特Multisizer 4e库尔特计数和粒度分析仪

小孔管的选择：30um

检测粒径范围:   0.6-18um

电解液：Isotone II

烧杯：100mL标配玻璃杯

测试结果和分析

1 均一性好的磁珠粒径分布和颗粒计数

200uL磁珠混悬液加入到100mL Isotone II电解液中，搅拌混匀后连续测试3次，得到如上所示的粒径分布图，并且通过定量分析，可以统计得到不同粒径区间内的颗粒数占比，对于粒径集中在4.5-7.0um单峰标样，我们可以定量分析得到浓度是1.30x10⁸个/mL。

2 均一性差的磁珠粒径分布和颗粒计数

同样200uL的磁珠混悬液加入到100mL Isotone II电解液中，搅拌混匀后连续测试3次，得到的粒径分布图中有2个主峰和1个拖尾的肩峰。按3.26um，4.00um作为间隔粒径，可以对着3个峰分别进行分析，可以看到在2-18um粒径区间内的颗粒浓度3.56x10⁸个/mL，其中2.00-3.26um最高峰颗粒浓度是2.21x10⁸个/mL（占比62%），而位于3.26-4.00um的第二主峰浓度1.10x10⁸个/mL（占比31%），两个峰占比总和超过90%。

另外，两个主峰的Peak粒径分别是2.930um和3.563um，粒径比为1: 1.2，以目前的激光粒度仪或纳米粒度仪都无法分辨出是2个峰，而只展示出1个单峰的结果，对于需要均一性好的用户而言，库尔特法做磁珠的生产质控无疑更加可靠。

3 CAR-T细胞激活用磁珠的浓度监控

CAR-T细胞激活用磁珠的浓度需要和细胞成一定的倍数，从而才能达到有效的激活。此次测试得到磁珠的浓度在3.90x10⁸个/mL，和标称的数据可以吻合，但有时因为存在批次间的差异，磁珠的浓度可以差50%以上，此时按标称的浓度添加到CAR-T细胞中，将无法有效地激活所有的CAR-T细胞，最终就会导致刺激实验的失败。

总结

通过Multisizer 4e库尔特计数和粒度分析仪，使用30um小孔管可以对600nm-18um范围内的磁珠做准确的粒度分布和不同粒径区间的颗粒数统计，相比常规的粒径检测方法分辨率更高，是一个很好的检测磁珠粒径大小和分布，以及确定磁珠浓度的分析方法。