代谢组学相关--糖类检测

　1. 产品简介

迈维代谢13种糖类数据库(MWDB)

　　糖类是多羟基醛或酮类及水解后能生成多羟基醛或酮的一类化合物，由碳氢氧三种元素组成。地球上生物量干重的50%以上是由糖的聚合物构成，糖类物质按干重占植物的85%-90%。糖类物质是生物体的结构成分，同时也是生物体内的主要能源物质。迈维代谢应用同位素内标，准确定量检测13种糖类物质。

　　2. 应用领域

　　◆ 果实营养品质的研究

　　◆ 逆境胁迫(高温、盐碱等)的研究

　　◆ 糖代谢调控途径的研究

　　◆ 糖生物活性(免疫调节、抗肿瘤等)研究

　　3. 技术特点

　　仪器平台：Agilent7890B-7000D GC-MS/MS

　　项目周期：45个自然日

　　样本要求：建议3g，最低1g

　　质控：混标、空白、混样。

　　4. 技术路线

　　5. 样品要求

　　植物激素检测样品要求

　　1.样品类型

　　a.细胞，取样后离心，去除培养基，立即放入液氮中，之后-80°保存;

　　b.叶片、茎、花等，取下后立即放入液氮中，之后-80°保存;

　　c.果实的果肉、果皮等，如果野外现场不具备分离条件，需尽快(30 min内)转移至室内，分离样品放入液氮中，之后-80°保存。

　　2.混合取样

　　每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例：取同一时期，表型基本一致的同一个部位的1片叶片，同时取6株，放到钻孔的10ml离心管中，并迅速放入液氮中。

　　3.样品重量和重复

　　新鲜的、干净的植物样品(鲜样)，样本建议量>1g，最少量>0.6g。

　　准备3份及以上生物学重复。

　　4.储存和运输

　　干冰运输(以3-4公斤干冰挥发一天计算，请使用足量的干冰运输)。

　　6. 文章案例

　　标题：阿拉伯糖的生物合成在拟南芥耐盐中的重要作用

　　方案设计：

　　1.通过EMS诱变筛选对盐敏感的突变体。

　　2.利用突变体和野生型杂交获得分离群体，并在盐敏感突体中鉴定到MUR4 基因的突变。

　　3.通过其它两个该基因发生突变的材料以及MUR4 基因过表达材料进行表型鉴定以及阿拉伯糖含量测定验证该基因导致了对盐敏感的表型。

　　结果分析：

　　1.作者利用EMS方法构建了高盐条件下根伸长受到抑制的突变体，通过盐胁迫发现，与野生型相比，两个突变体在MS培养基上根都能正常生长，但在MS培养基上添加NaCl，根伸长都受到抑制。这说明在盐胁迫下MUR4是根伸长所必需的。

　　2. 突变体盐胁迫处理后，Ara含量大幅度下降，将幼苗转移到NaCl培养基上并补充外源Ara，结果发现突变体的根伸长程度恢复到了野生型水平，而添加另外两种单糖并不能恢复突变体的表型。

　　3.在显微镜下观察mur4-1 突变体和野生型的根细胞，发现在正常条件下两种材料的根细胞形态并没有差异。但是在盐胁迫条件下，野生型能够保持根系伸长，而mur4-1 突变体的根细胞发生扭曲，它们的细胞与细胞间的粘附被严重破坏。

　　4.MUR4 的三个旁系基因MURL、DUR、MEE25 在盐处理后同样上调表达。分别得到三个基因的突变体进行盐胁迫处理，发现与野生型相比，它们的根伸长均未受到抑制。说明在盐胁迫下，MUR4/HSR8 在调控根伸长上起主要作用。

　　7.参考文献

　　Chunzhao Zhao, Omar Zayed, Fansuo Zeng. et al.Arabinose biosynthesis is critical for salt stress tolerance in Arabidopsis . Plant Physiology, 2019.

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