布鲁克创新方案——助力后新冠时代mRNA产品研发

在后新冠时代，众多药企开始布局mRNA产品，其中肿瘤疫苗和常规传染病疫苗成为竞争焦点。

mRNA候选药物的分析要求比传统生物制品更为复杂。制造mRNA产品需要独特的工艺步骤，如体外转录（IVT）和脂质纳米颗粒配方，因此会产生不同的分析需求。QC分析需确认mRNA序列、5'端加帽效率以及3'端的poly（A）尾的分布等。mRNA产品的表征和化学、制造和控制（CMC）测试还需进行脂质分析，如脂质纳米颗粒（LNP）成分分析（以确保配方中脂质的正确混合比例）、脂质ID确认以及杂质分析和筛选等。

布鲁克在mRNA分析领域拥有完整的解决方案。该解决方案结合了超高效液相色谱（UHPLC），TIMS离子淌度高分辨质谱或Q-TOF高分辨质谱，以及Biopharma Compass合规软件等，在提供丰富mRNA信息的同时，采用Biopharma Compass软件套装中的OligoQuest软件功能，可以多维确证mRNA序列信息，并简化mRNA分析的整个流程。

对于不同碱基长度的核酸药物，其分析策略也有所不同。如下图所示，对于如mRNA、rRNA等较大的核酸药物，采用常规bottom-up方法，酶解片段会因为长度太短而产生很多重复，难以判断具体的位置。

采用mid-down法，增加酶解片段的长度，提高酶解片段序列的特异性，可有效改善这一问题。与此同时，常规高分辨质谱难以区分核酸药物酶解片段异构体，而利用TIMS的超高离子淌度分辨率可有效解决这一问题，因此可提高如mRNA等复杂核酸药物的分析准确性。

mRNA的每个酶解片段，会按照寡核苷酸的序列确证流程，进行多维确证分析。下图为其中一个酶解片段（EPO mRNA 45-59）的多维确证界面，通过色谱、一级质谱、5‘端和3’端二级碎片等信息的确证，提高每个酶解片段乃至整个mRNA序列信息的准确度。

    如下图，借助于布鲁克质谱的宽动态范围，真实同位素模式结合SNAP算法，即使低丰度片段也能准确分析。

在mRNA分析工作中，mRNA的酶解步骤通常较难控制。布鲁克可通过搭载Sample Stream样品前处理平台，实现mRNA分析从样品前处理、数据采集、数据分析等的整套全自动流程，提高mRNA分析结果重复性的同时，简化分析流程并提高实验室效率。