小吸头上的大学问(之二)—吸附性

　　在移取低表面张力的液体(如含有清洁剂的试剂等)时，移液器吸头的内壁上通常会留下一层肉眼难以察觉的液体薄膜。这种液体残留的存在会导致移液结果的不一致和不准确，并造成珍贵样品的损失。

　　近年来，各种品牌纷纷推出低吸附吸头，希望能尽量减少这种残留对实验造成的影响。以下用不同供应商制造的低吸附吸头处理含有清洁剂的液体，观察吸头内的液体残留量，对比低吸附吸头的性能。

　　材料

　　Sartorius Optifit 标准吸头：200μ、350μl

　　Sartorius Optifit 低吸附吸头：200μl、350μl

　　Sartorius Saftyspace 低吸附滤芯吸头：120μl

　　其他供应商低吸附吸头：200μl、300μl

　　其他供应商低吸附滤芯吸头：200μl

　　Sartorius Picus电动移液器： 10-300μl，以4档速度吸液、1档速度排液

　　Sartorius mLINE 手动移液器：20-200μl

　　清洁剂溶液：0.1% Triton X-100，10% Tween 20，10% SDS，染色 10X PCR 缓冲液(含有清洁剂、密度试剂和跟踪染料)

　　Sartorius MC5 微量天平，Sartorius 分析天平BP211D

　　重量分析法

　　在移液后使用重量分析法对移液器吸头中的液体残留量进行测量。将装满试剂的小玻璃容器放在天平上，将重量设置为零。然后从容器中吸取一定量的试剂再把它释放回去，记录显示吸头中液体残留量的天平读数。针对上面列出的每个清洁剂溶液重复此项操作。

　　液体残留量对比

　　移取常用的清洁剂溶液时，对比 Sartorius 的标准吸头和低吸附吸头与其他 5 个供应商的低吸附吸头的性能。对所有液体进行测试后发现，Sartorius 低吸附吸头的液体残留量最低(图 1a)。某些其他厂商的低吸附吸头的性能甚至还不如 Sartorius 的标准吸头，这表明市场上的低吸附吸头之间存在着显著的性能差异。

图 1a 液体残留量对比

　　我们通过对下列清洁剂进行 200 μl 的移液时，将 Sartorius 标准吸头和低吸附吸头与其他 5 个供应商的低吸附吸头与进行了对比，这些清洁剂包括：10% Tween 20、0,1% Triton X-100 和 10% SDS。我们使用的是10-300μl 的Picus电动移液器，吸头容量为200 μl、300 μl 和 350 μl(其规格取决于各个供应商的产品规格和兼容性)。用重量分析法对吸头中的液体残留量进行测量。对每个供应商的 10 个吸头进行重复测试。

　　在另一个实验中，将含染色清洁剂的 PCR 缓冲液用作测试试剂，以对比不同低吸附吸头移液的精确性，并观察移液量如何影响吸头中的液体残留。如图 1b 所示，Sartorius 低吸附吸头的残留量最小。Sartorius 标准吸头的液体残留量甚至接近于某些厂商的低吸附吸头的残留量。使用 Sartorius低吸附吸头可获得最佳移液精确性，有力说明了这种吸头在PCR 等应用中的优势。该数据还显示，标准吸头和低吸附吸头在液体残留量上的差异随着移液量的增加而变大。原因是液体会吸附在吸头内部更大的表面上。

　　图 1b 对不同容量的染色PCR缓冲液进行移液，比较被测低吸附吸头的液体残留量及移液精确性

　　将 5 个其他供应商的低吸附吸头与 Sartorius 标准吸头和低吸附吸头(滤芯和非滤芯)进行对比。 使用容量为120 μl、200 μl 和 300 μl(其规格取决于每个供应商的产品规格和兼容性)的移液器吸头与 Sartorius mLINE®20-200 μl 对染色 PCR 缓冲液进行 20 μl 和 120 μl 的移液。使用重量分析法对吸头中的液体残留量进行测量。对每个供应商的10 个吸头进行重复测试。误差线代表标准偏差。

　　结论：

　　低吸附吸头在移取含有清洁剂的液体时比普通吸头具有明显的优势，能大大减少移液后吸头内的液体残留量。同时结果也表明，市场上的各种低吸附吸头在性能方面存在显著的差异。比较各种低吸附吸头，Sartorius低吸附吸头能确保最佳的样品回收率。

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