病毒去除技术在生物制药下游生产工艺中的重要性

　　病毒去除步骤对于保障生物制药产品的安全性与完整性而言必不可少。ICH Q5A法规指南要求治疗性生物制品制造商在他们的生产工艺中实施关键技术，即基于工艺特定病毒去除策略，对已知或未知的病毒污染物进行去除或灭活。此类病 毒去除步骤必须经过验证，表明所用的技术能够有效去除工艺过程中的各种已知的与不可预测的病。在ICH Q5A中提到”well designed separation steps, such as chromatographic procedures, filtration steps and extractions, can be effective virus removal steps provided that they are performed under appropriately controlled conditions. An effective virus removal step should give reproducible reduction of virus load shown by at least two independent studies”

　　目前市场上常见的单克隆抗体药物病毒去除技术有纳滤除病毒技术、pH孵放以及膜层析技术等，其中应用较为广泛的是截留率为20nm 的除病毒过滤器，该方法是从蛋白料液中除去病毒的有效方法，它是以大小排阻的机制实现的，可去除带包膜或不带包膜的病毒，但是需要进行病毒挑战试验，以验 证该步骤的病毒去除效果，病毒验证时通常使用缩小规模设备以生产过程中的参数进行病毒截留实验。例如采用专用的细小病毒过滤器Virosart CPV 和HF(20nm病毒过滤器)进行病毒进行截留和去除，达到法规要求的大于4 log 的截留目标，甚至超过此目标。

　　20nm除病毒过滤是一种相对成熟安全有效且被广泛应用的方法，理想的除病毒过滤器应该能够截留环境中潜在的病毒，并允许高的蛋白通过率，同时保持高流 速且不会发生显著的病毒流穿现象。当然过滤过程中，过滤器被逐渐堵塞而造成病毒流传也是普遍现象。所以选择合适的除病毒过滤器应该在保证安全性的前提下在流速、通量和成本之间达到一个平衡。如果一类过滤器有相应的数据证明在流速降低的情况下依然能稳定的保证病毒不流穿，首先就表明这个滤器拥有最高的安全 性，其次就需要考核它的过滤通量和价格。在价格可以接受的前提下适当调正过滤面积和过滤时间，保证工艺的经济性是大规模生产的需要。目前市面上使用最多的 细小病毒过滤器，例如Virosart CPV 和HF，在高Log降值(LRV)下，仍然能够有效地去除病毒，即使是在高流量衰减的情况下也可以达到很好的效果。