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同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学

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参考报价: 6000-7000 RMB(人民币) 型号: 同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学
品牌: 碧云天 产地: 上海
关注度: 19 信息完整度:
样本: 暂无样本 典型用户: 暂无

iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation,iTRAQ)是由AB SCIEX公司研发的一种多肽体外标记技术,该技术采用4种( iTRAQ® reagents-4plex)或8种( iTRAQ® reagents-8plex )同位素标签,通过标记肽段(Peptide)特异氨基酸位点,然后进行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样本中蛋白质的相对和绝对含量。


碧云天iTRAQ技术原理

iTRAQ试剂结构由报告基团(Report group)、平衡基团(Balance group)和肽反应基团(Amine-specific reactive group)三部分组成,形成4种或8种相对分子质量均等量(145或305)的异位标签,用于标记酶解后的肽段。在质谱中,任何一种iTRAQ试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。以4标试剂为例:报告基团相对分子质量分别为114、115、116和117;平衡基团相对分子质量分别为31、30、29和28,肽反应基团将iTRAQ试剂与肽段上赖氨酸(Lysine,K)及N端氨基酸残基相连,4种报告基团通过平衡基团与肽反应基团相连,形成4种相对分子质量均为145的等量异位标签。

iTRAQ试剂结构

在串联质谱中,报告基团、平衡基团和多反应基团之间的键断裂,平衡基团丢失,带不同同位素标签的同一多肽产生不同的报告离子,根据报告离子的信号强度可获得样品间相同肽段的定量信息,通过软件处理得到蛋白质的相对和绝对定量信息。

iTRAQ标记定量原理

碧云天iTRAQ技术服务项目表


服务编号服务名称服务时间(工作日)全额预付特价(元)/样本半额预付特价(元)/样本零首付价(元)/样本服务内容交付结果
T2301iTRAQ45-506000630070002标1. 蛋白质检报告;
2. 实验报告;
3. 生物信息学分析结果;
4. 质谱检测原始数据
T23025350565062504标
T23034888525058006标
T23044500480053008标
T2309组织提取定量≤10390420460 
T2310血液样本前处理130014001550 
碧云天iTRAQ技术服务询价与订购
  1. 请您下载并填写《碧云天蛋白质组学服务询价单》,发送至service@beyotime.com,我们将为您设计最佳方案。

  2. 若有订购意向,碧云天的技术服务人员会与您联系,并签订《碧云天蛋白质组学技术服务协议书》。

  3. 送样时,请下载并填写《碧云天蛋白质组学生物样品信息表》,发送至service@beyotime.com或碧云天蛋白质组学技术服务人员邮箱。样品的具体要求参见《碧云天蛋白质组学生物送样要求》。

碧云天iTRAQ技术服务特点
  1. 通量高:可同时对2-8个不同条件样本进行蛋白质差异分析;

  2. 适用范围广:iTRAQ试剂几乎可以与样本中所有的蛋白结合,同时因为是体外标记,所以对各种动植物组织、微生物、血液、体液、细胞培养物以及分泌物等样本均可进行分析;

  3. 灵敏度高:可检测出低丰度蛋白,胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等;

  4. 分离能力强:可分离出强酸(碱)性蛋白、<10KD或>100KD的蛋白质分子;

  5. 结果准确可靠:二级质谱蛋白序列覆盖率提高,鉴定结果更可靠,同时一个蛋白质有多个肽段被鉴定,进一步提高了定量的准确性;定性与定量同步进行,同时得出鉴定和定量结果,重复样品间的蛋白表达量相关性可达到0.95以上。

碧云天iTRAQ技术服务客户须知
  1. 建议送原始样本,除非客户已经熟练掌握蛋白质组学的蛋白提取方法。

  2. 动物组织样品:湿重不少于200 mg,样品不能溶血,PBS灌注冲洗组织直至去除血液。软骨或骨头等样本,建议不低于400mg。

  3. 植物组织样品:湿重不少于2 g,取材后用PBS冲洗至少3遍直至去除杂质。

  4. 菌体样品:原则上只接受常见无毒菌的菌体样品,菌体沉淀不少于100 mg或者体积不少于100 μL;若为含有毒菌的菌体样品或菌体裂解液,按照《病原微生物技术服务操作指南》执行。

  5. 细胞样品:收集细胞沉淀,PBS冲洗3遍(以防残留血清中的白蛋白影响鉴定结果),送样量为1×107或细胞沉淀不少于50 μl。

  6. 培养基上清液:需保证无菌体或细胞(用0.2 μm膜过滤),条件允许可浓缩后再寄送;送样体积不少于10 ml。

  7. 血清样品:新鲜血液取出后,4℃,2000 g,离心15 min,取上清,即得血清;血清制备过程中保证不能溶血;血清体积要求不少于500 μl;制备血清过程中,客户可根据自己样品和实验要求选择是否添加抗凝剂,一般不用添加。

  8. 若客户直接提供蛋白样品,则蛋白量不少于1 mg,浓度不低于2 mg/mL。

  9. 样品的具体要求及寄送条件详见《碧云天蛋白质组学生物送样要求》及《碧云天蛋白质组学生物样品信息表》。

碧云天iTRAQ技术服务流程

碧云天iTRAQ技术服务承诺
碧云天承诺提供:
完整的蛋白质组学实验报告(包括具体实验流程);
生物信息学分析结果;
蛋白质谱检测原始数据;
蛋白质检报告。
碧云天iTRAQ技术服务应用方向

疾病表型的分子机制研究、药物作用靶点研究、信号转导研究、蛋白质互作研究、分子标志物发掘、蛋白翻译后修饰

应用案例

Gezi Li, et al., Large-scale proteomics combined with transgenic experiments demonstrates an important role of jasmonic acid in potassium deficiency response in wheat and rice, molecular & cellular proteomics, 2017.
应用技术:iTRAQ
IF:6.3


同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学信息由 上海碧云天生物技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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