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小沃课堂∣气溶胶中是否含有新冠病毒？”沃”来告诉你
气溶胶中是否含有新冠病毒？
「沃」来告诉你
谈病毒色变，正如 2003 年中国 SARS 病毒，2014 年西非埃博拉病毒，2019 年年底至今，新型冠状病毒已席卷全球，成为了牵动千家万户的一场战役，关于新冠病毒的来源、传播、防护以及检测和疫苗研发一直是疾控和呼吸专家、诊断试剂盒和疫苗研发企业争相关注的重点，也是关乎老百姓生命安全的民生问题。
香港淘大花园 SARS 疑案、天津宝坻百货大楼 5 例新冠肺炎传染迷局以及网上爆出的多例非接触传染事件时时牵动着公众的注意力，「气溶胶传播」一词也随之成为焦点。
那么，新冠病毒是否会通过气溶胶传播而致多人感染呢
什么是气溶胶传播？
以下是关于新冠病毒「气溶胶传播」的主要新闻报道 ：
NEWS
2 月 8 日，上海疫情防控工作发布会上首次提到新冠病毒可以通过气溶胶传播。
2 月 9 日，国家为卫健委召开的新闻发布会上，中国疾控中心研究员表示新冠病毒的气溶胶和粪口等传播途径尚待进一步明确。
2 月 9 日，国家卫健委印发的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案 (试行第五版 修正版)》，其中对病毒传播途径的表述也显示，「气溶胶和消化道等传播途径尚待明确」。
2 月 15 日，国务院联防联控机制新闻发布会上，科技部社会发展司也表示尚无证据表明可通过粪口及气溶胶途径传播。
2 月 19 日，国家卫健委印发的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案 (试行第六版)》中，增加「在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能性」。
2 月 28 日，国务院联防联控机制新闻发布会上，科技部社会发展司也提示了气溶胶传播要同时满足密闭空间、较长时间、高浓度病毒这三个条件。
3 月 4 日，《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）》同样指出了气溶胶传播以及粪便和尿造成气溶胶传播的可能性。
关于气溶胶传播的基本概念
气溶胶：指的是气体中液体或固体颗粒的悬浮物，尺寸直径在 0.001～100μm 之间，可以长时间在空气中漂浮。
气溶胶传播：是指飞沫在空气悬浮过程中失去水分而剩下的蛋白质和病原体组成的核，形成飞沫核，可以通过气溶胶的形式飘浮至远处，造成远距离的传播。在某些特殊的条件下，也可能发生气溶胶传播，例如进行临床气管插管等专业医疗操作时。
微生物气溶胶：微生物以单细胞的悬浮状态，与干燥的固体颗粒（如尘埃）和液体微粒相连而在空气中悬浮形成的生物气溶胶，微生物气溶主要是细菌气溶胶、病毒气溶胶、真菌气溶胶。
病毒气溶胶：病毒粒径大小 80~100nm，＜2.5μm，属于细颗粒物范畴。
相比飞沫和接触传播，新冠病毒的气溶胶传播因其在空气中复杂多变的特征使得传播距离更远、传播过程更不可控并且危险性也会更强，给人一种防不胜防的感觉，因此对气溶胶中病毒的检测变得极其重要。
然而，由于致病病毒的特征以及在气溶胶中的低浓度和采集样品中病毒的存活能力，因此对其研究首先需要对病毒进行浓缩和富集，然后再通过相应的手段进行检测，以保证检测结果的真实可靠。
气溶胶病毒富集采样方法
空气（气溶胶）中病毒有以下三类常用的富集采样方法：
滤膜过滤法
滤膜过滤法富集病毒由于其便捷、高效、截留率高、可连续处理大量样品，是最常用的空气病毒的富集及空气净化方法。
过滤器收集结合 PCR 的检测方法是现行可以用来检测空气中低浓度的呼吸道病毒的有效方法。大气过滤式颗粒物采样器尤其适用于病毒气溶胶的采集。
微生物气溶胶采样器
滤材的选择对病毒的采集率及采集样品中病毒的存活率有较大的影响，其中聚四氟乙烯（PTFE）滤膜广泛用于大气气溶胶粒子的采样分析，其纯度高、本底纯净、易洗脱，既能高效捕获空气中的颗粒物及病毒，又不抑制后续病毒的核酸提取和 PCR 扩增，是一种新型高效的空气病毒采样滤膜。
Whatman TE35 PTFE 滤膜（0.2μm）
2003 年美国学者 Myatt 等首次将 PTFE 滤膜与半套式 RT-PCR 技术相结合，成功收集到空气环境中含量极低的鼻病毒【1】。
随后，Whatman 0.2μm PTFE 滤膜又多次被用于空气中流感病毒的富集采样研究【2】。除了 PTFE 外，石英纤维也常被用于空气病毒的富集。
Whatman 石英纤维 QMA、玻璃纤维滤膜
Whatman 品牌知名度高，滤纸滤膜结构均一，背景稳定，聚四氟乙烯 PM2.5 滤膜、石英微纤维滤膜（QMA）、GF/A 及 EPM2000 等玻纤膜是全球范围内细颗粒物采样中应用最广泛的标准滤膜，并且 PM2.5 PTFE 滤膜是美国 EPA 推荐的专用采样滤膜。
惯性撞击法
1) 固体撞击法
对病毒采集面为固体表面（营养琼脂或涂有粘性介质的固体表面）。固体撞击式采样器中应用最广泛的是 Andersen 六级筛孔撞击式采样器，常用于对空气中细菌和真菌的采集，有学者曾通过撞击式采样器成功捕获 SARS、腺病毒。其中，该Andersen 采样器配套聚碳酸酯（PC）膜是常用的气溶胶病毒采样方式。
六级筛孔撞击式微生物气溶胶采样器
Whatman 真实孔径聚碳酸酯 (PC) 膜
2) 液体冲击法
利用喷射气流的方式将病毒粒子收集在小体积的液体中。其中应用最广泛的全玻璃液体冲击式采样器 AGI-30 是国际空气生物学会议推荐使用的采样器，近年来也有国内外学者采用 BioSampler 液体冲击式采样器来捕获空气中的流感病毒。
AGI-30 液体冲击式微生物气溶胶采样器
3）气旋法
利用病毒粒子在气流旋转过程中的离心力，将病毒从气流中分离并捕集于采样介质中。目前应用最广泛的是由美国国家职业安全卫生研究所（NIOSH）研制的两级旋风气溶胶采样器，配套 37 mm 聚四氟乙烯（PTFE）滤膜，在流感病毒气溶胶研究试验中应用较多。
旋风式微生物气溶胶采样器
Whatman PTFE 滤膜
沉降法
1）静电沉降法
利用高压静电场使空气中的病毒颗粒带上一定量的电荷，然后附着于带相反电荷的采集面。这类采样器可以大容量采集到微生物气溶胶中浓度较低的病毒粒子，实现对浓度较低的病毒气溶胶的检测。
2）自然沉降法
自然沉降法采集空气中的病毒是一种最简单、最便宜的方法，应用范围广，一定条件下沉降的病毒可以直接收集在某种表面上。但由于自然沉降法是被动采样，受到多种外界条件的影响容易造成很大的误差，限制了其在空气检测中的应用。
Whatman 其它相关产品推荐
（可用于病毒细胞观察和计数）
真实孔径无机氧化铝 (AAO) 膜
网格纤维素膜：硝酸纤维素 (NC)、混合纤维素 (ME)
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大「疫」当前，Whatman 以百年沉淀的技术和丰富的经验支持精准「捕捉」病毒，积极助力病毒检测工作。沃特曼，让我们众志成城，早日赢得这场抗疫阻击战的胜利。
参考文献：
1.Myatt T A, Johnston S L, Rudnick S, et al. Airborne rhinovirus detection and effect of ultraviolet irradiation on detection by a semi-nested RT-PCR assay [J]. BMC Public Health, 2003, 3(1): 1~7
2. 莫浩联等. 采样介质对空气中流感病毒的富集效能 [J]. 预防医学情报杂志. 2012. 28(10): 772-775