高通量疫苗、兽药研发及兽药残留检测公共平台
作者: 潘刚（密理博中国生命科学部）
前言：本文摘选自《××农业大学高通量疫苗、兽药研发及农药残留检测公共平台的认证报告》，分为上下两篇。该系列分为高通量疫苗研发技术简介，兽药研发及农药残留检测技术简介，高通量疫苗及、兽药研发及农药残留检测公共平台共三期，希望对广大动物科学研究者有所帮助。
【平台简介】
高通量的疫苗、兽药研发及兽药残留检测公共平台主要采用悬浮芯片技术及独特的微毛细管技术的流式细胞术为主要研发平台。对病原体的检测主要采用PCR技术扩增后，应用悬浮芯片的xTAG编码小球进行高通量的筛查，并可利用xMAP编码小球来进行膜组分的蛋白质组学分析。采用8通道的微毛细管流式细胞术进行细胞计数及抗原表位的鉴定。特别重要的是在后期筛选检测疫苗时，配合高通量的全自动化样品处理系统、高通量的悬浮芯片检测系统及6色荧光8参数检测的easyCyte 8HT（蛋白质分析的4G平台），将大大加快疫苗的研发及筛选工作，并同时得到大量的高质量的体内和体外的实验数据，这可以大大提高疫苗研发的质量。
【平台组成】
* 高通量样品处理系统：Bio-TekELx405样品处理系统
* 悬浮芯片检测及研发平台：LuminexFLEXMAP 3D
* 微毛细管流式细胞检测及研发平台：easyCyte 8HT
Luminex FLEXMAP 3D悬浮芯片检测及研发平台
【FLEXMAP 3D简介】
FLEXMAP 3D系统由Millipore携手Luminex公司，联手打造的新一代高通量悬浮芯片分析和检测系统。该系统较上一代Luminex200在速度、多路检测和工作流程上都有了质的飞跃。借助于xMAP技术，能极大提高临床研究、制药、疫苗研发及学术核心实验室的研究水平和工作效率。
【三大突出特点】
1．创新的三色染色技术，最多能同时分析和检测微量样品中的500个指标。FLEXMAP 3D系统与Luminex200系统最大的创新点在于微球的染色技术，采用独特的三色染色技术，能同时完成对一个微量样品进行多达500种不同待测物的分析和检测；
2．双通道进样系统，极大提升数据获取速度和质量。2μl/s的高速双通道进样系统，可在一小时内最多获得48,000个高质量的分析数据；
3．96孔板与384孔板兼容。提供两种孔板选择，满足不同实验通量的需求。
【整合优势】
FLEXMAP3D系统将SD鞘液分配系统、主机及操作平台三者合而为一，具有高度整合的特性，系统优势主要有：
* 通量更高：每孔检测可多达500种检测物
* 速度更快：双通道处理增加了进样速度，一小时内最多可平行检测48,000个指标
* 选择更多：96孔板与384孔板均适用
* 操作更简单：自动开机，关机有常规操作，进一步简化操作流程。
* 软件系统更灵活。
【Milliplex Biomarkers配套研究工具】
多达150多种Biomarkers可供选择，涉及Biomarker研究的12个应用领域；
* 检测多达5个物种，包括人、小鼠、大鼠、非人灵长类和狗；
* All in one Box，试剂盒中提供了实验所需的所有试剂；
* 独特的磷酸化位点检测技术Milliplex EpiQuant创新专利，通过该技术，或实现磷酸化蛋白与总蛋白同孔检测及同一蛋白的多个磷酸化位点同时检测，实现定量检测磷酸化水平，并提供更多的磷酸化位点特异性抗体，在10-50μl 样本中实现更多指标检测，已可实现41个磷酸化蛋白/位点同时检测，通用的Buffer体系，解决了不同磷酸化蛋白实验体系互不兼容的问题；
* 20多年遍及全球及全球各大制药公司的Biomarkers专业服务，更为国内用户提供BOG专业服务。
微毛细管流式细胞检测及研发平台
--6色荧光8参数检测的easyCyte 8HT
【简介】
新一代的easyCyte 8HT与传统采用鞘流系统的流式细胞仪不同，是采用独特微毛细管细胞专利分析技术 (Micro-Capillary)的新一代流式细胞分析系统，它能对细胞等生物粒子的理化及生物学特性（细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等）进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理，同时利用荧光染料、激光技术、单抗技术以及计算机技术的发展，大大提高了检测速度与统计精确性，而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数，为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有力的手段。
【特色与优势】
1．样品需求量少，1000-10000个细胞/分析
2．无鞘液，最大程度减少废液产生，每8小时产生的废液量少于50ml
3. 仪器体积小，可直接放入超净台中进行无菌操作
4．高压注射泵与PEEK管路系统双重保证，免除流路阻塞(Clog)的烦恼
5．固化细胞流路，建立自稳流系统
6．上样体积精确可测，可实现直接的细胞绝对计数
【微毛细管细胞分析的基本原理】
待测标本制备成单细胞悬液通过荧光染色后进入微毛细管的流动室，由于微毛细管的虹吸作用样品流中细胞排成单列逐个经过激光聚焦区。如果我们将细胞中感兴趣的部分特异性的标上荧光染料，那么这些染料将在细胞通过激光检测区时受激光发出特定波长的荧光，通过一定波长选择通透性的滤色片，我们可将不同波长的散射光、荧光信号区分开来，并送到不同的光电倍增管中，经过一系列的信号转换、放大，数字化处理，我们就可以在计算机直观的统计染上各种荧光染料的细胞各自的百分率。选择不同的单克隆抗体及荧光染料，我们可以利用FSC、SSC同时测定一个细胞上的多种不同特征。
图：Guava专利的微毛细管系统
图：传统的鞘液流系统
【应用范围】
Micro-Capillary与单克隆抗体技术结合，可对细胞表面和细胞内抗原、癌基因蛋白及膜受体进行定量检测，流式免疫荧光技术不仅能将表达位点的细胞群区分开来，而且还能进一步区分各细胞亚群，及对抗原表位进行定量和定性检测。可广泛应用于疫苗研发，新型兽药研制及农药残留检测等。
Guava easyCyte 8HT系统配备488nm与635nm的高功率全固态半导体激光器，全固态半导体激光器使用寿命在25000小时以上。
easyCyte 8HT配置为：488nm与635nm固态激光器；FSC与SSC检测器；所有6色荧光检测皆适用PMT检测器；96孔板与10个Tube单管上样；InCyte数据获取及分析软件，兼容IC50/EC50分析功能。
适用于目前全部的细胞生物学分析实验。具有很好的开放型与适用性。软件操作简单，无需专人管理，体积小巧不需要专门房间放置。
更多详细参数，请进入密理博流式技术空间>>
若希望了解更多此平台的相关信息或希望索取《××农业大学高通量疫苗、兽药研发及农药残留检测公共平台的认证报告》，请填写下表：
https://millipore.wufoo.com/forms/cell-culture-protein-purification/