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使用 TSKgel Amide-80高效正相分配色谱填料分离糖类_1

发布时间: 2011-09-05 17:36 来源:东曹(上海)生物科技有限公司
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  糖类是一类基本物质,可表达各种生物活性,并可能独立存在或者与蛋白质或脂质形成复合物。对复合碳水化合物中的糖类和糖链进行分析可以为医疗、科研、食品等行业提供有价值的信息。在过去,糖类分析使用了各种方法,包括不同的高效液相色谱 (HPLC) 模式。

  根据聚合和缩合程度,糖类可分为单糖、双糖、寡糖 和多糖。单糖和双糖的分离方法包括阴离子交换色谱法(在存在硼酸条件下形成阴离子糖类硼酸复合物)、正相色谱法、配位体交换色谱法以及强碱性 pH 值条件下的阴离子交换色谱法。

  可选择的寡糖 分离方法包括凝胶过滤色谱法、正相分配色谱法和反相分配色谱法,而多糖 最常用的分离方法为凝胶过滤色谱法。

  理解这些分离模式的特点并为目标样本选择最佳分离模式,这一点很重要。

  在这些 HPLC 模式中,正相色谱(通常也被称为亲水作用色谱 (HILIC)可选择性地保留多元醇(例如糖类),而大部分低极性物质和一元醇物质则不保留,或接近不保留化合物的洗脱体积。正相色谱配以示差折光检测器,长期用于糖类分析,因为其提供了良好的选择性,并且分析时间相对较短。

  糖类分离的传统填料通常包括离子交换树脂 和氨基键合硅胶。这些填料在物理和化学稳定性方面不尽人意。TSKgel Amide-80 填料的固定相含有非离子氨甲酰基,并与硅胶颗粒进行化学键合。相较于所谓的氨基键合固定,非离子固定相赋予了 TSKgel Amide-80 优异的化学稳定性。固定相 -NH 基团的 H 原子可以和羟基或羰基的氧原子形成氢键,具有强大的锁水性能。这就在水溶性有机溶剂和水的混合溶液中形成了一个富水的分配相,使得采取正相分配模式进行分离成为可能。相较于非离子型二醇键合硅胶,其可以优先保留糖类和其他多元醇,并且可以在更实用的洗脱条件下使用。

  本报告介绍了 TSKgel Amide-80 的基本属性以及在中性单糖、糖醇和寡糖分离中的某些应用。

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