超敏液体活检技术前瞻：滚蛋吧，肿瘤君！

长期以来，通过对侵袭性活检获得的肿瘤组织进行组织病理学检查(HPE)是癌症诊断的常见方法，但它属于资源密集型的检测方法，并与手术是否存在高风险有很大相关性。而基于CTCs的诊断的临床潜力尚未实现，因为目前从外周血中采集CTCs的方法主要依赖于免疫磁富集或微流控分离，这两种方法都无法有效获取足够的细胞数量以有意义的应用。另外ctc在临床中的应用目前仅限于少数转移性肿瘤预后的数值评估。故探索一种既便于样本制备又具备高特异性和灵敏度的非侵入性的肿瘤早期预测的方法便尤为重要，它就是微小肿瘤细胞簇（C-ETACS）。

文章同时阐述了C-ETACs与CTCs的区别：C-ETACs包括CTCs (CD45阴性细胞，CD45阳性和CD8阳性细胞)，如肿瘤相关巨噬细胞和肿瘤相关白细胞，以及肿瘤干细胞(CD44阳性)，且它被定义为上皮细胞粘附分子 (EpCAM) 阳性属性的细胞簇（≥3个细胞）。

Keywords：

➤ C-ETACs (circulating ensembles of tumor-associated cells );

➤ CTCs (circulating tumor cells);

➤ Diagnostic triaging;

➤ liquid biopsy;

➤ noninvasive;

➤ solid organ cancers.

另外援引近日伦敦/美通社的一篇相关报道：

非侵入性癌症诊断领域的企业Datar Cancer Genetics凭借其TruBlood解决方案（一种癌症检测、诊断和管理的新范式）目前已获得欧洲合格认证（CE）标志。TruBlood是一种基于血液的非侵入式测试方法，用于对建议进行活组织检查的疑似癌症病例进行诊断评估。CE标志确认TruBlood符合欧洲医疗器械指令的要求。TruBlood解决方案对血液中循环是否存在微小肿瘤细胞簇（C-ETACS）进行评估。这些细胞在癌症患者的血液中非常普遍，而在没有癌症的个体中则无法检测到。对于向医生提出乳房、肺、前列腺、结肠和脑部可能指示恶性肿瘤的可疑增生的人们来说，这项测试将有极大的帮助。

大部分疑似病例通常只是良性肿瘤，因此用这种方法可以避免危险而且往往带来痛苦并耗费资源的侵入式常规活组织检查。这种创新型血液检测还可以帮助诊断因各种原因（如肿瘤接近重要器官或血管）而无法进行侵入性活检的病例，或用于合并症患者的诊断。TruBlood作为一种低风险的患者友好型诊断评估方法将被用于临床医疗路径，让检测出C-ETAC的患者优先接受活检，而C-ETAC检测结果阴性的患者可考虑在以后进一步评估或接受其他方法诊断。TruBlood标志着癌症诊断技术的一次重大飞跃；预期通过结合癌症生物学和基因组技术的最新进展以提高安全性和有效性，这种非侵入性检测方法将为医疗机构和患者都带来裨益。TruBlood的主要优点是无创，无需住院，而且特异性和敏感性极佳。

Mid Essex Health Trust肿瘤内科医师Tim Crook博士在对这一公告发表评论时表示：“TruBlood是一项创新性的调查方法，只需血液样本即可帮助诊断多种类型的癌症。这种方法采用尖端的基因组分析，以高精确度对癌症做出识别。TruBlood是一项激动人心的进步，将用于癌症诊断领域的众多用途。”

伦敦圣巴多罗买医院肿瘤内科医生Nick Plowman博士表示，“从外周血液中采集肿瘤细胞簇就像是肿瘤的非侵入性微活检。令人有些惊讶的是，即使在癌症的早期阶段，这种循环肿瘤细胞（CTC）簇也会出现，而优化的富集技术也提高了检测率和检测量。对这些癌细胞簇的评估可以促进细胞病理学（组织来源）诊断。这项测试不仅对患者友好，而且还能在治疗过程中跟踪癌症的基因组进化（及其持久性）。”

在《国际癌症杂志》（2019年）上发布的TruBlood检测方法初步数据中，有超过1.6万人的血液样本经过检测，包括5000名癌症患者和1万多名无癌症症状者，以证明C-ETAC是实体器官癌症的一个功能性特征。随后进行的一项研究于2020年美国癌症协会期刊《癌症细胞病理学》上发表了具有里程碑意义的数据，显示了非侵入性血液检测（液体活检）如何准确区分非癌性肿瘤和癌性增生；该研究以一个包括3万多名受试者的多机构国际合作项目为基础，其中包括大约9000个已知癌症病例。总体而言，TruBlood技术是基于对大约2.2万名癌症患者的共计4万多份血液和肿瘤样本的评估而开发完成的，具备非常充足的例证和强有力的应用普适性。

Figure 1: 利用CellInsight CX7高内涵成像分析系统进行多维验证：通过荧光图像验证C-ETAC为上皮细胞粘附分子 (EpCAM) 阳性属性的细胞簇（≥3个细胞）。

Figure 2: 利用CellInsight CX7高内涵成像分析系统进行多维验证：CTCs则定义为EpCAM阳性、PanCK阳性、CD45阴性的单细胞。

同时文章中也进行了基于高内涵系统分别对不同类型肿瘤组织间的相关验证工作以进一步阐述并验证C-ETACs的肿瘤特异性和灵敏性。总之，在这项大队列研究中，研究人员首次证明了该应用的临床潜力，将C-ETACs用于对疑似癌症病例的非侵入性诊断，特别是不适合进行活检或活检因任何原因难以进行风险评估的病例，以及更利于对临床诊断的决策性引导，目前的相关研究进展也朝着更便利更灵活的癌症早期预测的圣杯迈出了更加深远的一大步。

关于CellInsight高内涵成像分析系统：

➤ 高质量成像：高达7激光光源配置， Nadine-1精准筛选功能，全新Studio 分析软件；

➤ 高通量检测：支持高通量快速分析细胞模型及多维层扫功能；

➤ 多维评估筛选：细胞、组织表型及胞内多参数评估，药代及药效分析指标（超1000+自定义分析参数）；

➤ 多试剂方案支撑：结合实际应用需求可选择Invitrogen 多样化的标记试剂和抗体；

➤ 多应用拓展：适用于细胞凋亡分析、细胞周期和 DNA 修复、细胞活性与活力、细胞增殖、核转位等细胞功能检测、3D图像重构与可视化分析；

➤ 无人值守全新体验：可灵活搭载全自动化操作平台和Onstage-Incubator实时活细胞培养平台。