甲萘威在MV5浓缩仪中的回收率、重现性的测定

2019-02-13 16:54:36 北京莱伯泰科仪器股份有限公司

前言

甲萘威，又名西维因，是氨基甲酸酯类杀虫剂中第一个大量生产的品种，由于其杀虫普广、高效、低毒性，所以应用颇为广泛。但甲萘威的大量使用和使用不当，会使其在蔬菜中大量残留，危害人类健康。一般待测样品经均质、净化、固相萃取后体积较大，须经过浓缩、富集后才可在液相检测器中检出。MV5，即多通道平行浓缩仪，可进行样品的自动化浓缩处理。通过多次将加标样品用MV5浓缩后液相检测试验得出，在用酸和溶剂清洗试验试管、氮吹前在溶剂中加入2～3滴水、氮吹后淋洗试管、用流动相定容后上液相检测等不同的条件下逐步优化，可以得到甲萘威的加标回收率为88.90~93.65%，RSD为2.87%，具有较高回收率和重现性。

关键词：甲萘威 MV5浓缩仪

1.试验过程

1.1仪器与试剂

高效液相色谱仪(LC600 二元高压梯度高效液相色谱，北京莱伯泰科公司)；

MV5（多通道平行浓缩仪，莱伯泰科美国公司）；

10μg/mL 甲萘威标准工作液；

甲醇（色谱纯，Fischer 公司）；

流动相（甲醇：水=3：2）；

1.2 HPLC-UV分析条件

色谱柱：Promosil C18，5μm，4.6*150mm；

波长：280nm；

流速：5mL/min；

进样量：20μL；

流动相：（甲醇：水= 3：2）；

1.3试验方法

1.3.1甲萘威标样的配制

配制10μg/mL 甲萘威标准工作液，取标准工作液100 μL于2mL离心管中，并定容至1mL，作为标样。

1.3.2样品的制备

取甲萘威标准工作液100μL于洁净10mL试管中，加入甲醇5mL，置于MV5中氮吹，至溶液浓缩在1mL以内，取出后用移液枪将溶液移出至2mL离心管内，用少量流动相冲洗试管，并将冲洗液移至离心管中，用流动相定容至1mL混匀待测。

1.3.3HPLC-UV测定甲萘威回收率

用HPLC-UV分别测定甲萘威标样与样品，上样量均为20μL。出峰后计算峰面积，并计算回收率。

2.试验结果

2.1第一次试验

2.1.1试验条件

用市售洗涤剂和去离子水清洗试管。

用甲醇作为溶剂，氮吹结束后用甲醇定容。

MV5的设置：温度40℃，压力2psi，手动控制下降速度。

2.1.2试验结果

HPLC-UV测定甲萘威回收率计算结果如下表，甲萘威的加标回收率为30.49%~68.44%，重现性RSD为39.16%。

表1 第一次试验结果

2.2第二次试验

2.2.1试验条件

不用洗涤剂清洗，用硝酸或硫酸浸泡试验所用玻璃试管，再用甲醇溶剂清洗。

用甲醇作为溶剂，氮吹结束后用甲醇定容。

MV5的设置：温度40℃，压力2psi，手动控制下降速度。

2.2.2试验结果

HPLC-UV测定甲萘威回收率计算结果如下表，甲萘威的加标回收率为76.09%~91.08%，重现性RSD为8.97%。

表2 第二次试验结果

2.3第三次试验

2.3.1试验条件

不用洗涤剂清洗，用硝酸或硫酸浸泡试验所用玻璃试管，再用甲醇溶剂清洗。

用甲醇作为溶剂，氮吹结束后用流动相定容。

MV5的设置：温度40℃，压力2psi，手动控制下降速度。

2.3.2试验结果

HPLC-UV测定甲萘威回收率计算结果如下表，甲萘威的加标回收率为75.64%~81.27%重现性RSD为3.59%。

表3 第三次试验结果

2.4第四次试验

2.4.1试验条件

用甲醇作为溶剂，氮吹结束后用流动相定容。

MV5的设置：温度40℃，压力2psi，手动控制下降速度。

第一组氮吹结束后定容直接HPLC检测，不淋洗管壁；第二组氮吹结束后淋洗管壁再定容，HPLC检测。

2.4.2试验结果

HPLC-UV测定甲萘威回收率计算结果如下表，不淋洗管壁时甲萘威的加标回收率为69.22%~81.80%重现性RSD为8.43%。淋洗管壁时甲萘威的加标回收率为79.62%~89.18%重现性RSD为5.79%。

表4 第四次试验结果

2.5第五次试验

2.5.1试验条件

用甲醇作为溶剂，氮吹结束后用流动相定容。

MV5的设置：温度40℃，压力2psi，手动控制下降速度。

在溶液中加入1～2滴水，

2.5.2试验结果

HPLC-UV测定甲萘威回收率计算结果如下表，甲萘威的加标回收率为88.90~93.65%，重现性RSD为2.87%。

表5 第五次试验结果

2.5.3试验谱图

图6

3.结论与讨论

第一次试验，甲萘威的加标回收率为30.49%~68.44%，重现性RSD为39.16%，回收率低重现性差。用HPLC-UV检测出峰后，峰形不整齐对称，有拖延，且较宽，在后期出现了杂质峰。通过分析杂质峰发现，甲萘威峰面积越大，杂质峰越小，反之，杂质峰越大，甲萘威峰面积越小。

第二次试验，总结第一次试验经验，经分析得出洗涤剂偏碱性，用洗涤剂清洗试管后未冲洗干净，使试剂碱化，甲萘威在碱性条件下易分解，所以出现杂质峰。所以试验前将试验所需试管用稀硝酸或稀硫酸浸泡，并用甲醇溶剂清洗，待其完全干后再用于试验。试验结果为甲萘威的加标回收率为76.09%~91.08%，重现性RSD为8.97%。此次试验用HPLC-UV检测出峰后，无杂质峰，但峰形不整齐对称，还是有拖延。

第三次试验，针对第二次试验时出现的峰形不整齐对称、有拖延的情况进行分析，得出纯甲醇溶剂进入液相后，所以此次试验在氮吹结束后用流动相定容，再用液相检测。结果峰形较之前整齐对称，且变窄，无明显拖延现象出现，甲萘威加标回收率达75.64%~81.27%，重现性RSD为3.59%。

第四次试验，为提高甲萘威回收率，判断甲萘威在经MV5氮吹后的挂壁情况，将加标样品分为两组，第一组氮吹结束后定容直接HPLC检测，不淋洗管壁；第二组氮吹结束后淋洗管壁再定容，HPLC检测。实验结果，不淋洗管壁时甲萘威的加标回收率为69.22%~81.80%重现性RSD为8.43%。淋洗管壁时甲萘威的加标回收率为79.62%~89.18%重现性RSD为5.79%。可以看出不淋洗管壁对试验结果有很明显的影响，实验时应当充分淋洗管壁。

第五次试验，在之前的试验中发现，氮吹时在溶剂甲醇中混入少量的水可以有效提高甲萘威的回收率，所以在此次试验中MV5氮吹时，在溶剂甲醇中加入2～3滴水进行试验。试验结果为甲萘威的加标回收率为88.90~93.65%，重现性RSD为2.87%。在甲醇溶剂中加入水后，显著提高了甲萘威MV5氮吹的回收率，但这一方法只是试验经验所得，具体的提高原因还有待研究。

通过多次试验可以得出，在用酸和溶剂清洗试验试管、氮吹前在溶剂中加入2～3滴水、氮吹后淋洗试管、用流动相定容后上液相检测的条件下可以得到较高、较稳定的甲萘威回收率。