自来水中的隐患，现在知道还不晚！

⑴ D-SPE全自动固相萃取系统，莱伯泰科公司；

⑵高效液相色谱仪：LC600 二元高压梯度高效液相色谱，莱伯泰科公司；

⑶标样：微囊藻毒素-LR标准物质（农业部环境保护科研监测所，20μg/mL，溶剂：甲醇）；

⑷标样工作液：将20μg/mL标样用甲醇稀释至浓度为2μg/mL；

⑸甲醇（色谱纯， Fisher Chemical）；

⑹三氟乙酸（分析纯，天津市福晨化学试剂厂）；

⑺磷酸二氢钾（分析纯，北京化学试剂公司）；

⑻磷酸（分析纯，国药集团化学试剂公司）；

超纯水；

⑼固相萃取膜（3M, C18 47mm）；

⑽磷酸二氢钾溶液（0.05mol/L）：称取6.8g磷酸二1 ⑾氢钾，用水溶解，定容至1000.0mL；

⑿磷酸盐缓冲液：用20%（体积分数）磷酸溶液将磷酸二氢钾溶液调至pH到3；

⒀洗脱液：用甲醇将0.1mL三氟乙酸定容至100.0mL。

测试过程

★ 样品预处理

1L 自来水中加入100mg硫代硫酸钠，超声30min，待萃取。

★ 加标样品

在2.1的样品中加入200μL的 2μg/mL 微囊藻毒素-LR标准工作液，样品的加标浓度为400ng/L。

★ SPE富集及浓缩

按照图1所示的方法进行D-SPE方法编辑，加载并运行方法，D-SPE进行2.1或2.2中样品的SPE富集过程。

收集样品到收集瓶中，然后进行氮吹浓缩，当收集液浓缩到近干时，加入流动相定容到1.0mL，用0.22μm滤膜过滤，待检测。

图1 微囊藻毒素-LR SPE富集方法

★ HPLC检测方法

色谱柱：Promosil C18反相柱，5μm，4.6*250mm；

波长：238nm；

流速：1mL/min；

柱温：35℃；

进样量：20μL；

流动相：甲醇：磷酸盐缓冲溶液= 60：40

★ 0.4ppm微囊藻毒素-LR标样色谱图

图2 微囊藻毒素-LR标准色谱图

★ 空白样品色谱图

图3为空白样品色谱图，在微囊藻毒素-LR出峰位置处没有峰检出。

图3 空白样品色谱图

★ 加标样品色谱图

图 4 加标样品色谱图

★加标回收率

表1为加标回收率结果，微囊藻毒素-LR的回收率在80.1~86.4%，RSD 3.1%。

另，2.1步骤在 GB/T 20466-2006方法中是没有的，在没有这一步骤时自来水的回收率＜50%，添加了这一步骤后回收率＞80%。

本方法参考GB/T 20466-2006方法，使用Labtech D-SPE全自动固相萃取系统对自来水中微囊藻毒素-LR进行了固相萃取富集，利用液相色谱进行检测，得到方法回收率为80.1~86.4%。且仪器的平行性良好，适合水中微囊藻毒素-LR的检测。

参考标准

GB/T 20466-2006  水中微囊藻毒素的测定