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TUNEL检测: 基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP, 从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL法检测细胞凋亡的原理
一、服务流程1. 根据客户送的样本(固定好或者包埋好),以及样本类型,安排实验2.包埋或者切片后,根据客户所测指标,选取合适的一抗.二抗进行制片3.(可选)根据上述所做好的切片进行拍片4.(可选)针对做好的玻片进行分析,分析时选取较好的区域,分析三个视野5.提供实验报告:包括详细的实验方法及实验结果的相关图表 二、实验周期及价格三、交货内容 完整的实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂、蜡块玻片和相关分析数据 四、服务说明a. 请提供尽量多的实验材料b.客户须在实验开始前确保其细胞或组织中有目的蛋白的表达,并提供目的蛋白的相关信息(蛋白名称、大小等信息)c.客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担服务承诺:一.会在最短的时间内快速将实验完成二.保证检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果
TUNEL检测的原理:
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。
TUNEL检测(石蜡切片)
取下适当的新鲜的组织块固定于4%-10%浓度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛与组织块体积比在10:1和20:1之间,4摄氏度保存运输;
TUNEL检测(冰冻切片)
取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中,用干冰运输,固定好的切片应于-80或者-20度保存,并尽快用于检测;
TUNEL检测(细胞爬片)
细胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,换PBS缓冲液4度保存运输,尽快用于检测;
荧光法需要先拍一张凋亡荧光图,再拍一张原位染核图,再合并图层,终我们提供的为三张荧光图片。
我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、全方位的服务平台,为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前,协助发表的SCI及国家核心期刊上的学术论文达两千余篇,涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。
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