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英国Apogee Flow公司的ApogeeMix (Cat #1493)标准微球是一种非常成熟易用的混合标准微球:包括荧光标记的乳胶微球和无荧光标记的二氧化硅标准微球,粒径范围涵盖110nm到1300nm之间不同大小的标准微球。这种混合标准微球不仅可提供简便的方法来评估流式细胞仪散射光和荧光的灵敏度及分辨率,同时,内含多种不同大小的纳米级二氧化硅标准微球,更是可以更接近生物样品折射率的折射率(1.43)对流式细胞仪进行散射光校准,现已成为微小生物纳米颗粒流式分析的金标准参考微球。
ApogeeMix标准微球组成:
25ml的混合标准微球溶液,内含折射率=1.43,直径分别为180nm、240nm、300nm、590nm、880nm和1300nm的二氧化硅标准微球,以及折射率=1.59,直径分别为110nm和500nm的488激光激发的绿色荧光标记乳胶微球。该产品可以很好地用于评估流式细胞仪散射光和荧光的分析性能(灵敏度和分辨率)。下图是在Apogee A50-Micro流式细胞仪上分析的ApogeeMix典型数据(FL1=绿色荧光)。
绿色荧光标记的乳胶微球可用于评估流式细胞仪荧光灵敏度和不同折射率背景下的光学分析性能。
图1:不同大小标准微球在峰形图中的分辨率可很好地展现流式细胞仪的分析性能。理想情况下,8种不同大小的标准微球峰形群应相互分离,并可与仪器噪声明显区分开:
6种大小,折射率为1.43的二氧化硅微球和2种大小(110nm和500nm),折射率为1.59的绿色荧光乳胶微球(488nm激光激发)(中间图)。
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