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日立HPLC在乳酸发酵监测中的应用

发布时间: 2013-12-04 13:40 来源:日立高新技术公司

糖质在厌氧状态下,通过乳酸菌加以分解,作为分解产物产生乳酸的反应被称之为乳酸发酵。乳酸饮料及酸奶、腌菜等在生产中利用了乳酸发酵,所以含有乳酸成分。此次,尝试使用通用性较高的UV检测系统,对乳酸发酵过程中乳酸的生成进行了监测。另外,在对乳酸的生成进行监测的同时,还对TCA循环中有无柠檬酸、苹果酸、琥珀酸的蓄积进行了确认。结果显示,初始培养基中所含的有机酸成分在乳酸发酵过程中并未增加。

在有机酸分析中,通常使用有机酸分析专用柱(离子排除模式),而此次我们将介绍乳酸出峰时间更早、价格更低的反相色谱柱的测定例。本次使用的是适用于有机酸等极性较高的化合物测定的LaChrom C18-AQ色谱柱(低碳ODS)。

首先对LaChrom C18-AQ色谱柱和乳酸发酵过程进行简单介绍:

 

接下来,我们对有机酸标准样品以及乳酸发酵过程中的样品进行检测。

有机酸标准样品测定例(反相模式)

 

成分名称

苹果酸

乳酸

醋酸

柠檬酸

琥珀酸

浓度(mg/L

50

500

250

250

50

色谱条件:

标准样品谱图:

测定结果(标准曲线):

乳酸在40 2000 mg/L的范围内,线性相关系数1.000,得到了良好的线性。

 

培养样品测定例(培养时间及乳酸监测)

样品制备:

 

样品谱图:

 

             

 

检测结果:

        以50 g/L 的葡萄糖为碳源,在无氧条件下,对乳酸菌Lactobacillus casei 进行了培养。监测结果显示,在培养初期乳酸逐渐生成,至培养的第36个小时,约产生了18 g/L 的乳酸,并且随后发酵不再继续。并且,未见在这一乳酸发酵的过程中生成其他有机酸。

         更多详细资料,请参考:http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102446/s255880.htm

 

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标签:液相色谱

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