ionKey/MS优化血浆中缓激肽SPE LC-MS/MS定量检测方法

应用优势

  ■ 样品量减少2倍、灵敏度提升10倍，可以方便进行样品的多次进样，更好的满足ISR重复分析需求。

  ■ 溶剂耗量减少50倍，节省分析成本。

  ■ 采用混合模式SPE，可以减少基质干扰，增强在血浆中缓激肽萃取的选择性。

  ■ Oasis µElution96孔板可浓缩样品，并在最大程度上减少肽损失，使血浆中缓激肽的检测限达到5 pg/mL。

  ■ 选择性高的快速SPE提取（<30分钟）省去了耗时的免疫亲和纯化步骤。

沃特世解决方案

ionKey/MS^®系统

ACQUITY UPLC^®M-Class

IonKey™源

Xevo^® TQ-S

iKey™ 分离装置

MassLynx™

Oasis^®WCX 96孔µElution板

ACQUITY^®采集板

引言

对多肽类物质进行稳定、灵敏分析的需求是色谱分离和质谱测定的共同挑战。常见的肽通常难以通过LC-MS/MS进行分析，这是因为其不易离子化以及不易产生理想的碎片离子而导致MS灵敏度较低，从而使得LC和样品制备方法开发非常困难。之前的应用纪要（720004833ZH）详细说明了如何开发一种快速、灵活的SPE-LC-MS/MS分析方法，用于人血浆中缓激肽（图1）的定量；缓激肽是临床前或药物开发阶段重要的生物标志物¹。由于缓激肽在血浆中的浓度低至pg/mL水平且代谢速度快，在采血和样品制备过程中还可通过蛋白水解人为生成，因此对其进行准确定量相当困难。

在本实验中，使用ionKey/MS系统更新了整个LC-MS平台，新系统把UPLC^®分析集成到质谱源中（图2）。如图3所示，iKey分离装置（150  µm内径）包含流路、电子元件、ESI接口、加热器、eCord和色谱填料以发挥UPLC分离性能。此外，与2.1 mm内径色谱法进行比较，这种技术可显著提高灵敏度，是肽分析的理想方法。大多数生物分析LC-MS/MS方法常常消耗大量的溶剂和样品，从而增加了分析的成本和限制了可重复分析次数。除灵敏度增加外，ionKey/MS减少溶剂和样品耗量，提供足够的样品进行重复进样，更好的满足ISR测试需求。

下载应用纪要请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134786602&cid=511436