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Small RNA(Micro RNA)研究

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可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?

Small RNA(Micro RNA)研究

   Small RNA是一类高度保守的长度在18-30 nt的具有调节功能的内源性非蛋白质编码RNA分子,主要包括:miRNA、ncRNA、siRNA、snoRNA、piRNA、rasiRNA等等,主要位于基因间和内含子区域。Small RNA几乎存在于所有的生物体内,通过与靶mRNA的特异结合导致靶mRNA降解或者翻译受抑制,zei终调控基因的表达,对生物个体发育、代谢及疾病的发生等起着重要的影响。

主要生物信息分析内容:

序列去杂,测序质量评估;
小RNA长度分布;
Small RNA的分类注释;
鉴定已知的miRNA,预测新的miRNA和miRNA前体;
miRNA表达量分析与表达差异分析(表达差异需2个以上样品);
miRNA的靶基因预测,预测miRNA在生长发育过程中的作用;
miRNA的靶基因GO,KEGG分析;
miRNA与物种转录组数据联合分析(定制化);
miRNA靶基因与降解组联合研究(定制化)。

Small RNA的主要研究手段

    对small RNA的检测主要是通过生物芯片技术,但这些技术只能局限于研究那些序列已知的small RNA,无法发现和研究未知的small RNA分子。相比于传统的miRNA检测方法, 新一代测序技术具有检测完全且准确度高,可重复性好,通量高等优点,在探索研究small RNA上具有巨大优势。
    基于新一代高通量测序平台Illumina系统,一次可获得数百万条Small RNA序列,可以鉴定并定量出任何物种不同组织、不同发育阶段、不同疾病状态下全基因组水平的Small RNA。
    基于Illumina系统平台的Small RNA研究常用测序策略:Hiseq 2000,1×36 bp或1×50 bp,文库构建试剂盒:Illumina TruSeq Small RNA Pre Kit。该试剂盒既可使用total RNA,也可使用纯化好的small RNA为起始样品。

Illumina SmallRNA v1.5 Sample Prep Guide.pdf

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