采用柱后 TFA-Fix 技术或抑制器技术降低 流动相中三氟乙酸 (TFA) 对多肽质谱信号抑制作用

在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中，使用三氟乙酸 (TFA) 作为离子对试剂是常见的手段，流动相中的三氟乙酸 通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作 用，来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。同时反相色谱 与电喷雾质谱联用已成为多肽和蛋白质的分子量测定和结 构分析的重要工具，但是含有三氟乙酸的流动相对质谱离 子的产生具有抑制作用，一定程度上降低了液质联用技术 的灵敏性和分析可靠性。 目前常用的方法是降低流动相中 TFA 浓度， 达到降低这种 抑制作用，但是也会造成色谱分析质量的降低；而如果用 甲酸代替 TFA, 会造成色谱分离柱效降低，达不到理想的分 离效果。 本文采用双三元液相色谱系统 (DGLC)，充分利用双泵的优 势，将两个泵分别作为流动相的输液泵和柱后溶液的传输 泵，实现与质谱的全自动连接。采用 TFA-Fix 技术或者抑制 器技术降低流动相中 TFA 对 MS 的离子产生的抑制作用， 尤其是柱后抑制器技术大大提高了多肽样品在质谱上的灵 敏度。 测试条件一 仪器：Ultimate DGP 3600 系列，包括带有在线脱气单元的双 三元梯度泵 DGP-3600RS、自动进样器 WPS-3000TRS、柱温 箱 TCC-3000RS、检测器 DAD-3000RS 和 MS TSQ Vantage。仪 器连接装置见图 1。色谱质谱条件见表 1