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PCR温度实时检测系统

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你的PCR仪温度漂移吗?
你的PCR仪温度均一性好吗?
你的PCR仪温度准确性高吗?
质量标准和资格认证已经成为现代实验室的重要问题。

PCR扩增是分子生物学领域的zei常用技术。不管是在基础研究还是临床诊断领域,PCR 的应用越来越广泛。在使用PCR仪时,消耗品和试剂对zei终结果的影响还不是很清楚,但是PCR温度控制的影响却是很明确的。市场上众多品牌和型号的PCR仪在技术上有很大的不同,我们认为必须建立一个良好的质量控制程序。

很多年以前,CYCLERtest公司已经开始研究PCR温度测试产品和温度变化对于PCR实验结果的影响。1998年MTAS服务作为评价和认证PCR仪温度控制的方法已经进入了Benelux市场。2002年,这套系统在全世界面世。CYCLERtest公司也以温度传导测试领域的世界领导者而倍感自豪。

温度评价的目的不仅仅是要确认仪器的质量。大多数的实验室工程师对于PCR仪器都碰到过一些无法解释的问题,而那些问题与反应混合物的组成无关。就像对于一台特定的仪器经常有不确定的表现,研究者经常抱怨“我的反应一直正常,但这台仪器怎么就出问题了?”根据我们的经验,这完全是个案,而不是两台PCR仪共有的问题。甚至同一个品牌,同一个型号,都会显示出不同的温度性能,而这对实验成功至关重要。

影响PCR仪温度控制性能主要有四种因素:

一.PCR仪之间的差别对实验结果的影响。如前所述,没有任何两台PCR仪的温度控制是一模一样的。相对于预设的温度,模块温度总是偏高或偏低,就是同一模块不同的孔之间,温度有时也会不一样,相差可能达几摄氏度之多。一些PCR仪温度控制性能的不足造成的后果是:当PCR仪的模块温度在升温/降温时,温度会出现过高/过低现象,而不能准确的达到预设的平台温度。

二.温度控制技术的差别对实验结果的影响。导致PCR仪温度控制性能优劣的因素首先是温度控制技术。调节PCR仪模块的温度,使其达到并保持在某一温度有很多方式,每一种方式都有优点和缺点。另外,这些技术被运用的水平对于温度控制的水准是很重要的,且有很大不同。大多数PCR仪的温度控制性能是很差的。在单一或多传感器控制机制上的不同显而易见的引起了温度的不均一性。

三.仪器老化对实验结果的影响。虽然PCR仪没有任何的机械或可移动部件,但是那并不意味着它不会磨损。电子器件的性能会随着时间的延长而老化,并由于过度的使用而加速老化。Peltier元件的失效或磨损会引起模块的热斑或冷斑,通常PCR仪不能识别这种由于机械磨损,模块延展和收缩效应引起的温控性能的不同。因此,为掌握这些情况,实时监测PCR仪的温度控制性能是十分重要的。出于同样的原因 ,PCR仪温控性能的失常通常是实验失败或毁坏循环反应的重要原因。

四.外部因素对实验结果的影响。不同PCR仪品牌与型号在温度控制性能上的不同直接影响了三个平台温度的准确性和均一性,从而影响了整个PCR反应的实验结果。另外,升温速度的不同,温度下降梯度的不均一性,温度过高/过低也是重要的因素。zei糟的情况是一个本该阳性的结果却可能得出阴性的结果。对于实时定量PCR,荧光信号输出和产量/熔解曲线,直接与温度控制有关系,而这些结果很可能是戏剧性的。

五.实验室认证。根据以上的论点,很多实验室已经不得不适应一些认证。和ISO、GMP、GLP标准一样,必须证明所有的实验室程序是按照标准程序所操作的。对于一些实验室,只有当他们采用已经被合作组织或专业委员会测试的或认可的程序时才可以称他们自己是合格的。


应用领域
1.PCR仪/试剂盒大量采购商
2.认证机构和检测机构
3.PCR制造商
4.试剂盒生产商
5.诊断用户和科研用户
6.质控管理部门
7.实时定量PCR用户

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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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