采用高效液相色谱法测定常通口服液中大黄酸的含量

常通口服液为我院研制的中药制剂。具有益气化淤，行气通腑的功能，用于腹部外伤或腹部手术后腹膜粘连。处方中大黄为君药，大黄酸（C15H8O6）具有抗菌抗癌、导泻利尿的作用，是其功效成分之一。因此，选此成分的含量测定为质量控制标准。

采用高效液相色谱法，使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液64：36，检测波长为230nm。以大黄酸对照品浓度X为纵坐标，峰面积Y（μg）为横坐标，绘制标准曲线。线性回归方程为：Y=9.534×10-6X+0.1934,相关系数r=1.0000。此方法线性关系良好。说明进样量在0.0402-0.804μg范围内,对照品浓度与峰面积呈线性关系。平均加样回收率98.84%，RDS为0.86%。方法简便可靠，精密度高，分离度好，可用于常通口服液的质量控制。
采用高效液相色谱法

测定常通口服液中大黄酸的含量







[摘要] 目的：建立常通口服液中大黄酸的含量测定方法。方法：采用高效相色谱法，使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液64：36，检测波长为230nm。结果：此方法线性关系良好，平均加样回收率98.84%，RDS为0.86%。结论：方法简便可靠，精密度高，分离度好，可用于常通口服液的质量控制。

[关键词] 常通口服液 大黄酸 含量测定 高效相色谱法



常通口服液为我院研制的中药制剂。具有益气化淤，行气通腑的功能，用于腹部外伤或腹部手术后腹膜粘连。处方中大黄为君药，大黄酸（C15H8O6）具有抗菌抗癌、导泻利尿的作用，是其功效成分之一。因此，选此成分的含量测定为质量控制标准。

1 仪器和试剂

Waters高效相色谱仪（美国），Million32色谱数据处理软件。甲醇（色谱纯），水为重蒸馏水，其它试剂为分析纯。大黄酸对照品（供含量测定用，批号0757-9804）由中国药品生物制品检定所提供。样品常通口服液为南方医院药学部试制。

2 色谱条件

Waters C18液相色谱柱（150×4.6mm, 5μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液64：36，检测波长为230nm，流速为3-4ml·min-1。在此条件下，大黄酸的保留时间约12min，与其它峰分开。大黄酸对照品、常通口服液的高效液相色谱图见图1、2。









图1 大黄酸标准品HPLC色谱图 图2 常通口服液HPLC色谱图



3线性关系考察

精密称取大黄酸对照品0.00402g，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，制得对

照品储备液，取储备液适量，加流动相制成1ml含201、4.02、8.04、12.06、20.10、40.20μg的对照品系列溶液，各依法进样20μl，按上述色谱条件进行测定。以大黄酸对照品浓度X为纵坐标，峰面积Y（μg）为横坐标，绘制标准曲线。线性回归方程为：Y=9.534×10-6X+0.1934,相关系数r=1.0000。说明进样量在0.0402-0.804μg范围内,对照品浓度与峰面积呈线性关系。

3 对照品溶液与供试品溶液的制备

对照品溶液的制备：精密移取大黄酸对照品储备液适量，加流动相稀释为浓度为8.04μg/ml对照品溶液。

供试品溶液的制备：精密移取常通口服液10ml，加入1ml0.8%的磷酸溶液，加入甲醇定容至20ml，摇匀，离心10min，取上清液用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即为供试品溶液。

空白溶液的制备：取除大黄的药味按同一工艺制成的缺大黄空白样品0.2ml，按供试品溶液制备方法操作，即得。

4 精密度实验

精密吸取8.04μg/ml的对照品溶液10μl，注入高效液相色谱仪,连续测定5

次，大黄酸的平均峰面积为831543,RSD=0.18%（n=5）。表明结果精密度良好。

5 稳定性试验

精密吸取室温保存的同一对照品溶液10μl,同法每间隔一定时间进样测定,

共5次,结果表明供试品溶液在7天内无明显变化，表明此对照品基本稳定, RSD=0.49%.

6 重复性试验

取同一批常通口服液6份各10ml,依法测定,结果大黄酸含量的平均值为

165.62,RSD=2.15%(n=6)。说明方法重复性较好.

7 回收率试验

精密吸取已知含量的常通口服液10ml,精密加入3ml大黄酸对照品储备液（每

1ml含大黄酸8.04μg）,按供试品溶液制备法制备,依法测定,结果见表1。样品平均回收率98.84%,RSD=0.86%(n=6)



表1 常通口服液中大黄酸加样回收率试验结果



试验号 已知含量 测得量 回收率 平均值 RDS

/μg /μg /% /% /%

1 284.52 98.45

2 283.89 97.93

3 284.89 98.76

4 165.79 285.24 100.41 98.84 0.86

5 286.89 99.05

6 284.52 98.45



注:对照品加入量120.60μg



9 样品的测定

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μl,注入高效液相色谱仪测定,样

品测定结果见表2.



表2 样品测定结果（n=3）

序号 批号 大黄酸含量（μg/ ml）

1 20010810 3973.39

2 20010904 3151.95

3 20011121 2136.80

10 讨论

因供试品色谱有较多的杂质峰，要求较高的柱效，因而理论板数定为按大黄酸峰计算应不低于5000。

该方法简便可靠、精密度高， 分离度好，可用于常通口服液的质量控制。

Determination of Rhein
In the CHANGTONG Oral Liquid By HPLC


HOU Lian-bing YANG Xi-xiao
( NanFang hospital pharmacy of The first military medicaluniversity, Guangzhou 510515,China)

Abstract: Object To develop an HPLC method for determining Rhein inthe CHANGTONG Oral Liquid. Method The contents of Rhein wasdetermined by HPLC. Prodigy ODS(3)C18 column was used, withmethanol –0.1% phosphoric acid 64:36as the mobile phase anddetected at the wavelength of 230nm. Results The average recoveryof Rhein was 98.84%, RDS= 0.86%. Good linearity of Rhein wasobtained (r=1.0000) within the range of 0.0402-0.804μg . ConclusionThis method was simple and accurate and was not interfered by otherconstituents in the prescription, can be used for quality controlof CHANGTONG oral liquid.