3.15海能在行动！实验检测饲料中的喹乙醇

央视3·15晚会，是广大消费者信赖的舆论阵地，也是维护消费者权益的代名词。今年3·15晚会主题为“用责任汇聚诚信的力量”。有关食品安全的话题，依然是晚会关注的重点。“销售日本辐射区食品”、“多家饲料厂商滥用兽药”、“无资质保健品向老人伸出黑手”……还有多少在暗流中蠢蠢欲动？

    海能仪器针对晚会曝光问题，迅速做出反应，并提供解决方案，希望对您有所帮助。

事件：饲料中的喹乙醇

在今年的3.15晚会中，披露报道了饲料厂商乱用添加剂，饲料原料表隐瞒喹乙醇等非法添加剂的问题。

危害解读：

喹乙醇又称喹酰胺醇，商品名为倍育诺、快育灵，由于喹乙醇有中度至明显的蓄积毒性，对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在的三致性，即致畸形，致突变，致癌。因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。《中国兽药典》(2005版)也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。

    在此我们通过具体实验对喹乙醇进行了检测，希望能给大家带来帮助。

饲料中喹乙醇的检测

解决方案

    1.前言

喹乙醇又名奥喹多司，为浅黄色结晶性粉末，无臭，味苦。溶于热水，微溶于冷水，在乙醇中几乎不溶。化学名为2－[N－2－羟基－乙基]－氨基甲酰－3－甲基－喹恶啉－1，4－二氧化物。

    2.实验参考标准

《农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定 液相色谱-串联质谱法》

    3. 仪器与试剂

    4. 试剂：

    色谱纯：甲醇、乙腈、甲酸。盐酸、二甲亚砜、磷酸二氢钾。

    6mL HLB固相萃取柱

喹乙醇标品：纯度>97.0%

    仪器：

液相色谱-串联质谱仪；配电喷雾离子源；分析天平；离心机；SPE 400 全自动机械臂固相萃取仪；涡旋混合器；水浴超声波清洗仪；0.22µm有机相滤膜；其它为常规玻璃仪器。

    4.实验过程

（1）样品制备

准确称取配合饲料、精料补充料和浓缩饲料2g，或预混合饲料1g，以及相同质量的基质匹配空白试料，分别于50mL聚丙烯离心管中。加入0.1%甲酸-乙腈溶液10mL，涡动1min，40℃超声10min。9000r/min离心15min，收集上清液。残渣用0.1%甲酸-乙腈溶液10mL重复提取一次，合并两次提取液，混匀，为总提取液。准确量取5mL总提取液于10mL试管中，使用HN200多功能氮吹仪，60℃下氮气吹至约2mL，加入0.1mol/L磷酸二氢钾溶液4mL，充分溶解残留余物，为备用液。

（2）样品净化

取HLB固相萃取柱，依次用3mL甲醇和3mL水活化。去备用液过柱，依次用0.02mol/L盐酸3mL和5%甲醇淋洗。用5mL甲醇洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，加入20%乙腈溶液1mL充分溶解，过0.22μm滤膜，上机测定。

（3）标准曲线

称取6个空白饲料，按以上步骤进行样品处理后制得多个1mL空白基质样品溶液，混合均匀。准确移取合适浓度的喹乙醇标准储备液，氮气吹干，用1mL空白基质样品溶液溶解，配制成浓度为25、50、100、200、500、1000μg/mL的标准工作液，过0.22μm滤膜，上机测定，绘制标准曲线。

（4）测定

    色谱参考条件：

色谱柱：C18（2.1×150mm，5µm，100Å）

流动相：A:0.1%甲酸的乙腈溶液 B:0.1%甲酸的水溶液

流速：0.2mL/min

进样体积：10μL

表1. 梯度洗脱条件

    质谱参考条件：

离子源：电喷雾（ESI），正离子模式

扫描方式：多反应监测（MRM）

电离电压：2.8KV

源温：80℃

雾化温度：350℃

锥孔气流速：27L/h

雾化器流速：600L/h

表2. 定性、定量离子和锥孔电压、碰撞能量

    式中：

    A  ——试样溶液中对应目标药物的峰面积；

    As  ——基质匹配标准溶液中对应目标药物的峰面积；

    Cs  ——基质匹配标准溶液中对应目标药物的浓度，单位为µg/mL；

    V  ——净化液体积，单位为mL；

    M  ——样品的质量，单位为g；

    V1  ——分取液体积，单位为mL；

    V2  ——总提取液体积，单位为mL。

    测定结果用平行测定的算数平均值表示，结果保留三位有效数字。

    基质匹配标准溶液特征离子图